"kullikesed" - 1 õppematerjal

Molekulaar- ja rakubioloogia

segades (et ei tarduks ära) ~50 kraadini.  Lisasime 200 µl X-gal, 200 µl ampitsiliini ja 25 µl IPTG-d – lac promootorit aktiveeriva reagenti  Valasime sööde Petri tassile ja panime tarduma Bakteri kasvamiseks sööde peale:  Suspendeerisin bakrerid topsis edadi-tagasi ning pipeteerisin tardunud söötmega Petri tassile  Selleks, et bakterid asutsid ühtlaselt, panin klaaskullikesed tassile ja loksutasin.  Valasin kullikesed etanooli lahusesse ja jäätsin tass inkubaatorisse üleöö kasvamiseks. 2 päeva möödudes tulin tagasi laborisse. Minu tassi peal kasvasid nii valged, kui ka sinised kolooniad (nende suhe oli ~ 50/50). Sinised kolooniad sisaldasid plasmiidi, vaid ei sisaldanud inserdi, aga valged sisaldasid õige plasmiidi. Valisin kõige suurema valge koloonia ja panin neid kasvama:  Võtsin epsi, kus tegin augu (ilma hapnikuta bakretid suervad ära)