Biokeemia praktikumi juhend
graafia (IMAC, immobilized metal ion affinity chromatography,) põhineb aminohapete
tugevale interaktsioonile metalliioonidega koordinatiivsete sidemete tekkimise kaudu.
Statsionaarseks faasiks on kandjale seotud kelaadi vormis metalliioonid. Enamkasutatavad
on nikkel, koobalt ja vask histidiini sisaldavate valkude puhastamiseks ning raud, tsink või
gallium fosforüülitud valkude ja peptiidide puhastamiseks.
Reeglina on kromatografeerimisprotsessid aeglased ja labiilsete komponentide koostises
võivad toimuda muutused. Samuti on oht proovi komponentide hajumiseks kolonni läbimise
vältel, mistõttu lahutusvõime langeb. Kaasajal kasutatakse laialdaselt kõrgsurve-
vedelikkromatograafia meetodit (HPLC, high-performance liquid chromatography). Sellega
saavutatakse kõrge lahutusvõime tänu väga väikeste (35 m), sfääriliste ja võimalikult
ühesuuruste kandjaosakeste kasutamisele, mille puhul vedeliku kolonnist läbisurumiseks