Invertaasi aktiivsuse määramine
Invertaasi aktiivsuse määramine põhineb sahharoosi kui mittetaandava disahhariidi hüdrolüüsi
läbiviimisele uuuritava ensüümipreparaadi toimel ja vabanenud taandavate monosahhariidide glükoosi
ja fruktoosi detekteerimisele reaktsioonisegus.
Sahharoosi hüdrolüüs invertaasi toimel.
Glükoosi ja fruktoosi koguse kinladktegemiseks kasutatakse kompleksomeetrilist meetodit.
Põhireaktiiv tugevalt leeliselise reaktsiooniga lahus, mis sisaldab vask(II) triloon B konpleksi.
Leeliseline komplekslahus toimib invertaasile inaktiveerivalt (kuna invertaasile on vaja happelist
keskkonda) ja lõpetab reaktsiooni.
Pärast hüdrolüüsireaktsiooni võetakse taandavaid suhkruid ja keedetakse segu komplekslahusega, mille
tulemusena moodustub punane sade Cu2O ja ekvivalentses koguses vaba triloon.
Triloon B tiitritakse 0,02M vasksulfaadi lahusega (indikaatorina mureksiidi vesilahus).
Invertaasi aktiivsus määratakse mikrokatalites 1 ml ensüümilahuse kohta.