Rakubioloogia II
Sade koguneb põhja,supernatant peale
Raku komponentide eraldamine pideva ja astmelise tihedusgradiendi abil.
Valkude kromatograafilise lahutamise kolme erineva viisi (ioonvahetus-, geelfiltratsioon-
ja afiinsuskromatograafia) põhimõte.
Ioonvahetuskromatograafia – positiivselt laetud kerakestele seostuvad negatiivselt laetud
molekulid. Positiivselt laetud molekulid ei seostu ja tulevad kolonnist läbi.
Geelfiltratsioonkromatograafia – väiksed molekulid takerduvad poorsetesse kerakestesse,
suured läbivad kolonni vabalt.
Afiinsuskromatograafia – keraksetega kovalentselt seotud molekulidele seostuvad neile
spetsiifilised molekulid.
SDS-polüakrüülamiidgeel elektroforeesi tööpõhimõte.
Proov geelile, valgud liiguvad + poole, saab hinnata valkude suurust
Valkude ülekanne SDS-polüakrüülamiidgeelilt membraanile ning nende tuvastamine
antikehade abil.
Geelilt kantakse membraanile, inkubeeritakse antikehadega, loputatakse, inkubeeritakse