Meditsiinilise mikrobioloogia praktikum
• radioaktiivsed (32P, 125I, 35S) või
• mitteradioaktiivsed (biotiin-avidiin, digoxigeniin,fluorokroomid).
Radioaktiivselt märgistatud sondide kasutamine kliinilises diagnostikas on komplitseeritud. Rohkem on
kasutamist leidnud biotinülatsioon, mida on võimalik avastada avidiinile seotud ensüümi lisamisega.
Hübriidi sedastatakse kromogeense substraadi lõhustamise käigus toimuva värvusreaktsiooni abil, mida
hinnatakse visuaalselt või spektrofotomeetriliselt. Kemiluminestsentsi kasutatakse kommertsiaalses
süsteemis Gen-Probe.
ÜHEAHELALISE SIHTMÄRK-DNA VÕI -RNA VALMISTAMINE. Kuna hübridisatsioon baseerub
komplementaarsusel, on vajalik, et uuritav nukleiinhape oleks üheahelaline. Samuti on oluline, et
sihtmärgiks oleva DNA või RNA primaarne järjestus püsiks muutumatuna.
HÜBRIDISATSIOONIREAKTSIOON LAHUSES. Selle formaadi korral on nii sondina kui ka sihtmärgina
kasutatav nukleiinhappe ahel vedelas keskkonnas