Meditsiinilise mikrobioloogia praktikum
suspensioon PCR masinasse, kuumutada suspensioone 950 C juures 10 min jooksul (spetsiaalne
programm).
II RAPD-PCR REAKTSIOONI ETAPP – VAHETU PCR REAKTSIOONI TEOSTAMINE
3) PCR segu valmistamine. PCR reaktsiooni toimumiseks on vajalikud järgmised
komponendid: sihtmärk DNA (bakterilt), spetsiifilised praimerid , Taq-polümeraas, nukleotiidid,
puhvrid ja soolad.
Ready-To-GoTM PCR Beads on kommertsiaalne kit (Amersham Pharmacia Biotech), mille puhul
on tegemist 0,2 ml PCR katsutitega, mis sisaldavad lõppreaktsiooni mahu tingimustes (25 µl)
alljärgnevaid komponente:
• ~1,5 U Taq-DNA polümeraasi;
• 10 mM Tris-HCL (pH 9,0);
• 50 mM KCL;
• 1,5 mM MgCl2;
• 200 µM igat dNTP;
Töö käik.
1. Lisa katsutisse, mis sisaldab PCR kuulikest, reagendid alljärgnevas järjestuses:
1.1. 2 µl praimerit ERIC1 R (5’-ATG TAA GCT CCT GGG GAT TCA C-3’);
1.2. 2 µl praimerit ERIC1 F (5’-AAG TAA GTG ACT GGG GTG AGC G-3’);
1.3
annaabi.ee 
