3.2. Proteolüütilise ensüümi aktiivsuse määramine
puhta kuiva pipetiga 3 ml reaktsioonisegu, viin esimesse TKÄ-d sisaldavasse katseklaasi (0-
proov) ja loksutan hoolega.
Peale proovi võtmist asetan reaktsiooniseguga katseklaas tagasi termostaati.
Täpselt 5 minuti pärast võtan saa pipetiga 3 ml reaktsioonisegu teise katseklaasi ja klaasi sisu
loksutan hoolega läbi.
Sama operatsiooni kordan veel 2 korda, s.t. ensüümireaktsiooni 10-ndal ja 15-ndal minutil.
Reaktsiooniproduktide sisalduse määramine ja aktiivsuse arvutamine
Proovidega katseklaasit jätan 15 minutiks sademe formeerumiseks.
Sel ajal panen valmis 4 puhast ja kuiva katseklaasi ning varustan neid väikeste plastlehtrite
ning paberfiltritega.
15 minuti pärast filtrin kuivadesse katseklaasidesse. Saadud filtraadid on täiesti selged.
Spektrofotomeetril määran nelja, erineval ajal reaktsioonisegust võetud proovi optilise
tiheduse väärtused lainepikkusel = 280 nm (D280), kasutades 1 cm läbimõõduga
kvartsküvette.
Minu tulemused:
I. 0,310 A
II. 0,436 A
III
annaabi.ee 
