Proteolüütilise ensüümi aktiivsuse määramine
kui polüpeptiidahelas on katkenud ainult üksikud peptiidsidemed.
· Proteaasi aktiivsuse määramise meetod põhin kaseiini hüdrolüüsil proteaasi toimel ja
järgneval trikloorädikhappega mittesadeneva hüdrolüüsiproduktide sisalduse määramisel
spektrofotomeetrilise meetodi kasutades.
· Aromaattuuma omavad aminohapped ( Tyr, Phe, Trp) omavad neeldumismaksimume UV-
piirkonnas lainepikkusel 270-280 nm, siis väljendatakse kasieiini hüdrolüüsi produktide
sisaldus türosiini kontsentatsioonina mg/ml ja kasutades kaliibrimisgraafikut leitakse
absorbtsiooni väärtuse järgi türosiini kontsentratsioon kindlatel aegadel reaktsioonisegust
võetud proovides.
Töö käik.
· Valmistame proteaasi preparaadist lahuse valmistamine.(Alkalaas)
Peab olema sobiv pH (meie juhul aluliseline). Lahuse ensüümi kontsentratsioon on 1,6
mg/ml