"invertaais" - 1 õppematerjal

Invertaasi aktiivsuse määramine

Tiitrimiseks kulunud 0,02M CuSO4 lahuse hulga järgileitakse taandavate suhkrutesisaldus proovis Invertaasi aktivsuse leitakse kasutades valemi: kus: C1 ­ taandavate suhkrute sisaldus aja hetkel T võetud proovis, mg C2 ­ taandavate suhkrute sialduse 0 ­ proovis, mg V1 ­ hüdrolüüsisegu üldmaht, ml 1000 ­ tegur üleminekuks mikrogrammidele T ­ hüdrolüüsi kestus, s 180 ­ glükoosi moolmass V2 ­ proovi maht taandavate suhkrute määramiseks, ml V3 ­ uurimiseks võetud invertaais lahuse maht, ml. Töö käik. 1. 100 ml koonilisse kolbi pipeteeritakse 25 ml 7%- list sahharoosi lahust, mille ph on 4,8 (reguleeritud atsetaatpuhvri abil). Lahus asetatakse vesitermostaati 30ºC juurde soojenema (5- 10 min). Tehakse ka uuritav invertaasi lahus. selleks kaalutakse 0,0208 g tahket invertaasi ja lahustatakse seda atsetaatpuhvris 5 ml-ni (pH = 4,8). 2. Kolme koonilisse kolbi mahuga 250-300 ml pipeteeritakse 10 ml komplekslahust. 3. 5-10 min