2. Südamiku ettevalmistus Lamineeritud puitplaati hööveldatakse, et saavutada vajalik paksus. Masina abil puuritakse puidu sisse augud, kuhu seejärel kinnitatakse metallist inserdid, kattes augud esmalt klaaskiulehega. 3. Kihtide kokkupanek Aluskihi külgedele paigaldatakse teraskandid. Seejärel asetatakse aluskihile klaaskiudleht ning kantakse sellele epoksüvaiku. Järgmiseks kihiks on
Et valmistada 40 ml 1.5% geeli on vaja 0,6 g agaroosi ja , et valmistada 80 ml 0,8% geeli on vaja 0,64 g agaroosi. 10 Töö nr 4: Rekombinantse plasmiidi inserdi suuruse määramine restriktsiooni ja/või PCR abil (kumba meetodit kasutada, otsusta eelmise töö põhjal, hinnates inserdi ligikaudset suurust) Kasutame PCR-i. Restriktsiooni ei saa kasutada, sest meie inserdid on <1000 nukleotiidi ning me ei suuda neid enam detekteerida, kui restriktaasiga lõikame. Lähteained: Rekombinantne DNA (~100 ng/l) Restriktaas Cfr42I (SacII) (10u/l, Fermentas; http://www.fermentas.com/; vt lisa) Restriktaasi 10 x puhver (lisatakse 1/10 reaktsiooni mahust) Agaroos (FMC) 1 x TBE foreesi puhver (TBE, 50 mM Tris-boraat, pH 8,3; EDTA-Na2) 1 x TBE foreesi pealekandmis-puhver Molekulmassi marker (DNA, 1 kb või 100 bp "ladder"; 100-200 ng raja kohta)