Veterinaarne geneetika
Selleks kasutatakse kas isepaljunevaid
süsteeme või PCRi. Isepaljunevad süsteemid – vektorid on kas bakterite plasmiidid või
viirusvektorid (viib soovitud geeni rakku).
5. Mis on plasmiid?
Plasmiid – autonoomselt replitseeruv DNA rõngasmolekul. Sisaldab replikatsiooni
alguspunkti, selektiivset markerit (ampitsilliiniresistentsuse geen) ja unikaalseid restriktaaside
lõikesaite. Suurus varieerub 1-400 kbp. Identseid plasmiide võib olla 0-tuhandeid.
Insenerigeneetikas nim plasmiide vektoriteks.
6. DNA kloonimise põhietapid isepaljunevas süsteemis.
1. plasmiid isoleeritakse bakterirakust (E. coli)
2. plasmiidi lõigatakse kindla restriktaasiga
3. sama restriktaasiga lõigatakse huvipakkuv DNA lôik kromosoomist välja
4. isoleeritud DNA lõik "istutatakse" plasmiidi
5. plasmiid viiakse bakterirakku, bakter kasvab ja plasmiid paljuneb
6. paljundatud geen isoleeritakse plasmiidist.
7
annaabi.ee 
