Biokeemia praktikumi töö nr. 3.1 - INVERTAAS
keskkonna ja vask(II)-triloon B kompleksi.
Kindlal ajahetkel reaktsioonisegust võetud taandavaid suhkruid sisaldav proov viiakse komplekslahusesse ning
keedetakse, mille käigus taandub kompleksis sisalduv Cu(II) suhkrute toimel Cu(I)-ks ja moodustub punase
sademena sadenev Cu2O ning lahusesse jääb ekvivalentses koguses vaba triloon B:
Jägnevalt tuleb määrata tiitrimise teel triloon B kogus, kasutades 0,02M vasksulfaadi lahust ning indikaatorine
mureksiidi. Tiitrimisel komplekseerub vabanenud triloon B uuesti Cu(II)-ioonidega ning seda näitab ka indikaator:
Kulunud CuSO4 koguse järgi leitakse kaliibrimissirgelt taandavate suhkrute kontsentratsioon reaktsioonisegus.
Invertaasi aktiivsus avaldatakse mikrokatalites 1g kohta.
Töö käik:
I. Ensüümipreparaadist töölahuse valmistamine
Valmistan 4ml lahust ensüümi kontsentratsiooniga 3mg/ml (lahusesse 12mg) tahkest ensüümipreparaadist.