Biokeemia praktikumi juhend
Afiinsuskromatograafiat kasutatakse mingi komponendi
väljapuhastamiseks segust puhverlahusesse ja kontsentreerimiseks, mingi komponendi
35
sisalduse vähendamiseks segus või ligandide otsimiseks. Statsionaarse faasina
kasutatakse tavaliselt geelimaatriksit (enamasti agaroosi), kuhu on kinnitatud ligand, millele
seostub spetsiifiliselt mingi uuritava segu komponent. Kõige laialdasemalt kasutatakse
kahte afiinsuskromatograafia liiki:
· immuunoafiinsuskromatograafiat,
· metallkelaat-afiinsuskromatograafiat.
Immuunoafiinsuskromatograafia puhul on statsionaarseks faasiks kandjale seotud
antigeen, mida kasutatakse antikehade eraldamiseks, näiteks, vereseerumist.
Metallkelaat-afiinsuskromatograafia ehk immobiliseeritud metalliiooni afiinsuskromato-
graafia (IMAC, immobilized metal ion affinity chromatography,) põhineb aminohapete
tugevale interaktsioonile metalliioonidega koordinatiivsete sidemete tekkimise kaudu.