Molekulaar- ja rakubioloogia
tõstsin 2 minutiks jääle (membraaniaugu sulegemiseks)
Lisasin segule 500 µl vedelsöödet ja panin inkubeerima 30 min-ks inkubeerima 37 C 5
juures (et rakud jaguksid)
Tsentrifugeerisime bakterid põhja 3000 rpm 2 min ja rakupeal olev sööde valasin
kraanikaussi
Meie huvipakuvad bakterid nüüd sisaldavad ampitsiliiniresistentsus geeni ja ei sisalda glaktosidaasi –
see on meie selektsiooni põhimõtte. Nüüd tuleb neid paljundama ja selekteerida. Selleks paneme neid
kasvama sööde peale. Valmistasime söödet, kuhu panime ampitsiliini (antibiootikumi toimel surevad
ära kõik ilma plasmiidita bakterid) ja X-gali, mis on laktoosi analoog, vaid glükoosi asemel on indool,
mis vabaneb glükosiidsideme hüdrolüüsi käigus, ning oksüdeerub ja värvub siniseks.
Sööde valmistamiseks: