Biokeemia praktikumi juhend
Tüüpiline kromatografeerimissüsteem koosneb kolonnist, eluendi reservuaarist ja
automaatsest fraksioonikogurist ehk kollektorist (vt joonis). Kolonni ülaosa on suletud
korgiga, mida läbib klaastoru, mis ühendatakse kolonnist kõrgemal asetseva eluendi
reservuaariga. Sellisel juhul algab kolonni väljavoolukraani avamisel kohe eluendi
pealevool kolonni täidisele ja fraktsioonikoguri käivitamisel ka automaatne fraktsioonide
kogumine. Kuna antud praktikumis viivad segude geelkromatograafilist lahutamist korraga
läbi mitu üliõpilast, siis pole automaatse kromatografeerimissüsteemi kasutamine
otstarbekas.
Tüüpiline kromatografeerimissüsteem.
Praktikumis kasutatakse klaaskolonne, mis juba eelnevalt on täidetud pundunud
dekstraangeeliga Sephadex. Meie töös uuritavate ainesegude lahutamiseks sobivad
reeglina väiksema poorsusega (tihedamad) Sephadex'i margid, mis on samas ka
mehaaniliselt tugevamad ja võimaldavad kolonni kiiret voolutamist