Molekulaar- ja rakubioloogia
Inkubatsioon sekundaarse antikehaga, selleks on vaja:
Valmistada 0,2% BSA-PBS lahus (400 μl):
• 40 μl 2% BSA lahust
• 60 μl 1x PBS-Tweeni
• Goat anti mouse 1:2000 Alexa568 (punane värv) 0,2 μl
• Inkubeerida 45-60 minutit toatemperatuuril, kaitsta valguse eest. Sekundaarse antikeha valikul
tuleb jälgida, millises loomas on tehtud primaarne antikeha. Sobiv fluorokroom tuleb valida
selle järgi, milliseid teisi fluorokroome veel samal preparaadil kasutate. Praktikas kasutatakse
korraga tavaliselt 2-3 antikeha, on võimalik ka rohkem. Fluorokroomid on üldiselt tundlikud
valguse suhtes, sellepärast on vajalik ka neid liigse valguse eest kaitsta.
• Pesta 3 korda 5 minutit 1 ml PBS-Tweeniga. Pesta 2 korda 5 minutit 1 ml PBSiga
• Pesta 1 kord 1 ml MQga
Alusklaasidele panemine ehk sulundamine, selleks on vaja: