Praktiline töö - SDS-PAGE PROTEOOMIKA
1. Trüpsin 23,8 kDa
2. EPGluC 29 kDa
3. Laktaat dehüdrogenaas 35 kDa
4. HRP 44 kDa
5. Ovalbumiin 44,3 kDa
6. BSA 66,3 kDa
7. Tundmatu valk X kDa
2. Inkubeerisime denatureerimiseks 95oC juures 5 minutit.
3. Jahutasime valguproovid jäävannis.
4. Raputasime eppendorvid, et saada valgutilgad põhjale.
Foreesiaparati asetamine:
Proovide jahutamise ajal asetsime geel foreesiaparaati. Seleks täidsime puhvrikambrid
jooksupuhvriga (0,25 M TRIS, 1,92 M glütsiin, 0,1% SDS, pH 8,3) ning eemaldasime kammi.
Forees:
1. Igasse taskusse kandsime 20 µl valguproovi. Viimasse taskusse panime 3 µl foreesredeli -
Thermo Scientific PageRuler Unstained Broad Range Protein Ladder.
2. Asetasime foreesivannile kaas, ühendasime juhtmed vooluallikaga ning lülitasime