"elustamisefaas" - 1 õppematerjal

Molekulaar- ja rakubioloogia praktikum

ampitsilliini. Loksutame segamini ja valame söötme õhukeste kihtidena Petri tassidele.  Teeme transformatsioonisegule kuumašokki 50sekundit 42 kraadi juures. Meetod seisneb selles, et CaCl2 tõttu DNA tõmbus rakumembraanide ligi. Ja nüüd kui paneme oma segu sooja, siis membraanikahjustuse tagajärjel DNA migreerub raku sisse.  Tõstame tuubi 5minutiks jääle jahutma  Järgneb elustamisefaas. Selleks lisame 500 µl vedelat LB söödet ja inkubeerime 30 minutit 37 kraadi juures.  Tsentrifuugime bakterid põhja  Eemaldame sööte bakterite pealt  Suspendeerin, et tekiks ühtlane lahus  Kannan bakterisegu Petri tassile.  Kallan klaasterad tassile ja loksutan et bakterid laiali kanduksid.  Asetame tassid 37 kraadi juurde kasvama . Mida ja miks me transformeerime? Millist tulemust ootad?