"elueerin" - 1 õppematerjal

Molekulaar- ja rakubioloogia praktikum

1,5x300=450µl Töö käik:  Lõikan skalpelliga geelist enda fragmendi välja. (0,15g)  Lisan ADB puhvri geelile.  Inkubeerime 55kraadi juures 5minutit, kuni geel on täielikult sulanud.  Pipeteerin kogu koguse ränikolonni.  Tsentrifuugin – DNA jääb räni külge ja ülejäänud puhvri viskan ära.  Pipeteerin peale 200 µl pesupuhvrit, tsentrifuugin ja kordan.  Tõstan kolonni puhtasse 1,5ml tuubi. Elueerin DNA kolonnist elueerimispuhvri abil. Inkubeerin paar minutit laua peal  Tsentrifuugin 1 minuti. Seejärel on tuubi põhjas elueerinud PCRi produkt lahustatune elueerimispuhvris.  Kontrollimiseks segan kokku 2 µl eluaati, 6,33 µl MQ ja 1,66 µl 6x värvi. Tsentrifuugin ja kannan geelile. Geeli pilt tulemuste all. Tulemus: Minu rada nr8. Miks on vaja PCR produkti puhastada?