"elektroforeesivann" - 1 õppematerjal

Meditsiinilise mikrobioloogia praktikum

MOLEKULMASSI MARKER. • DNA suurusmarker (size standard). Teadaoleva suurusega DNA proovid saadakse tavaliselt plasmiidi või bakteriofaagi DNA lõikamisel restriktsiooniensüümidega. Hea oleks omada nii kõrgmolekulaarmassiga 1 kb - >20 kb fragmendi pikkusega standardit kui ka madala molekulaarmassiga 100-1000 bp fragmendi pikkusega standardit. PCR PRODUKT, mis saadi eelmises praktikumis Protseduur: 1. Valmista ette piisav kogus elektroforeesipuhvrit, et täita elektroforeesivann ja teha agaroosgeel. Väga oluline on kasutada nii geelis kui vannis täpselt sama puhvrit. 2. Valmista vajaliku %-ga agaroosilahus, lisades agaroosi foreesipuhvrisse. 3. Kuumuta segu mikrolaineahjus, kuni agaroos on lahustunud. 4. Samal ajal kui geel jahtub, otsi välja vajaliku suurusega kammid ja aseta need geelialusele ettenähtud kohta. Jälgi, et kammi alumise otsa ja geelialuse vahele mahuks piisav kogus geeli, et tekiks tugeva põhjaga geelihammas.