Elektroforeesi aparaadi kokku panemine
Praktiline töö nr. 2: SDS-PAGE elektroforees
NB! Geeli valmistamisel kasutasime akrüülamiidi, mis on tervisele kahjulik, seetõttu töötasime
kummikinnastega.
Elektroforeesi aparaadi kokku panemine
Geelikihtide valmistamine:
1. Valmistada lahutav geel (resolving gel) (10%), mis koosneb järgmistest komponentidest:
Akrüülamiid 30%/ bisakrüülamiid 0,8% 3,3 ml
4x lahutava geeli puhver (1,5M Tris-Cl, pH 8,8) 2,5 ml
10% SDS 0,1 ml
mQ 4,0 ml
APS 70 µl
TEMED 7 µl
Segasime omavahel antud järjekorras kokku:
vesi
4x lahutava geeli puhver
SDS-i 10% lahus
akrüülamiid/bisakrüülamiidi lahus
Viimastena lisasime TEMED tõmbe all (ebameeldiva kalmaitselise lõhna pärast) ja seejärel APSi,
mis kat...