Molekulaar- ja rakubioloogia
• Lasta kuivada ja säilitada pimedas (valgustundlik!)
Kolmas päev – fluorestsentsmikroskoopia
Oma rakkude vaatlemiseks kasutame 60x õliobjektiivi, mille kasutades tuleb esmalt
katteklaasile lisada tilk immersiooniõli.
Vaatlesime rakke rohelises, punases ja sinises kanaalis:
Figure 4. pEGFP/FoxO3a-ga transfekteerunud rakud. Roheline – FoxO3 liitvalk (ekspresseerub koos
EGFPga. Liitvalk asub nii tsütoplasmas kui ka tuumas, kuna ta on transkriptsiooni vaktor. Tuumas signaal
on tunduvalt tugevam, mis on täesti oodatav. FoxO3a on transkripstiooni faktor, valk on reguleerib
apoptoosi ja kaitseb raku oksüdatiivse stressi eest. On näidatud, et valgu madal ekspessioon on seotud
tumorgeneesiga.
tugmeva
Figure 5 Primaarse antikehaga mouse anti tubuliin ja sekundarse antikehaga (goat anti Mouse