Meditsiinilise mikrobioloogia praktikum
Nukleiinhapetel põhinevad meetodid
Molekulaarsed diagnostikameetodid jagunevad kolme rühma:
1. hübridiseerimine,
2. amplifitseerimine (võimendamine või paljundamine)
3. nukeliinhapete ensümaatiline lõhustamine.
Nukleiinhapete hübridisatsioon
Hübridisatsioon põhineb nukleiinhapete komplementaarsuse printsiibil, s.t. kaks üheahelalist
nukleotiidide ahelat ühinevad omavahel kaheahelaliseks nukleotiidahelaks – s.o. dupleksiks ehk
hübriidiks vaid juhul, kui neid moodustavad nukleotiidid on komplementaarsed: adeniinile (A) vastab
tümiin (T) ja tsütosiinile (C) guaniin (G). Hübridisatsioonireaktsiooni korral on üks nukeliinhappe
järjestus pärit “tuntud” mikroorganismilt (näiteks gripiviiruselt A). See ahel on proov ehk sond
(probe). Teine ahel kuulub uuritavale mikroorganismile ehk sihtmärgile (target), mida püütakse
kindlaks teha