Glükoosisisalduse määramine ensümaatilisel meetodil
Värvilise ühendi kontsentratsioon on võrdelises sõltuvuses
uuritava proovi glükoosisisaldusest.
POx-i toimel oksüdeeruva kromogeense substraadina kasutatakse mitmeid erinevaid
orgaanilisi ühendeid. Lisaks orgaanilistele ühenditele võib substraadina kasutada K4[Fe(CN)6]
(kollane veresool). POx katalüüsib Fe2+ oksüdatsiooni Fe3+-ks, millega kaasnevalt
vesinikperoksiid redutseerub veeks. Tekkiv K3[Fe(CN)6] (punane veresool) annab lahusele
kollase värvuse ja on detekteeriv lainepikkusel 410 nm. Reaktsioon kulgeb pH 6 juures.
Töö käik: Käesoleva töö ülesandeks on glükoosisisalduse määramine mingis bioloogilises
objektis, milleks mina kasutasin mett. Selleks kasutasin tööreaktiivi, mis sisaldas
eelkirjeldatud ensüüme glükoosi oksüdaasi ja peroksüdaasi ja kromogeenset substraati
K4[Fe(CN)6].
Uuritava lahuse (tundmatu proovi) ettevalmistamine
Uuritava lahusena, milles glükoosi kontsentratsiooni määrama hakkasin, kasutasin mina mee
tõmmist