Molekulaar- ja rakubioloogia
antikehaga saab seostuda mitu sekundaarset antikeha.
Alusklaasidele panemine on vajalik mikroskopeerimiseks. Sulundamislahus sisaldab DAPI-t,
mis seondub DNA-ga ning fluorestseerub siniselt, see võimaldab fluorestsentsmikroskoobiga
näha ka DNA-d.
14. a. Kontroll-plasmiidiga rakud:
Pildil on näha siniselt DNA, roheliselt edukalt transfekteeritud rakkudes ekspresseeritud GFP
ning punaselt antikehaga värvitud tubuliin.
pEGFP FoxO3a-ga transfekteeritud rakud:
b. Valke detekteerisin kahekihilise reaktsioonina. Primaarseks antikehaks oli Mouse anti
tubuliin 1:500 ja sekundaarseks antikehaks Goat anti mouse Alexa546 1:2000.
c. Sekundaarne antikeha on valitud kasutatud primaarse antikeha järgi. Kuna primaarne
antikeha oli tehtud hiires, kasutasime kitses toodetud antikehasid, mis tunnevad ära hiire
primaarsed antikehad (mouse anti tubuliini). Need on konjugeeritud punase Alexa546
fluorokroomiga.
d. Kasutasime sinist, punast ja rohelist fluorokroomi