Immunoloogia praktikumi protokoll
Marker- valkude segu, mis on kindla suurusega.
Töö käik:
1. Geeli valmistamine:
Lahutav geel (alumine Kontsentreeriv geel
geel), (Ülemine geel) , 4%
10%
Vesi 4,5 ml 3 ml
4x separating( stacking) 2,5 ml 1,25 ml
buffer
40% 2,5 ml 0,5 ml
acrylamide(AA)/bisacryl
amide 37,5:1 (Bio-Rad)
APS 100 µl 100 µl
TEMED 10 µl 10 µl
Lõpp-maht 10ml 5 ml
Eeskirja järgi segame kõik komponendid kahte tuubi.
APS ja TEMED on katalüsaatorid, kiirendades geeli tardumist.
Geeli valmistamisel paneme APS-i mõlemasse tuubi korraga, aga
TEMED-i algul ainult alumise geeli tuubisse, sest lahused