"bakterisademe" - 1 õppematerjal

Molekulaar- ja rakubioloogia praktikum

200 µl Lahus E3 Normaliseerib pH 420 µl Isopropanool Sadestab 200 µl Etanool Peseme soolad välja Töö käik:  Paneme valged kolooniad vedelsöötmesse kasvama. Inkubeerima 37 kraadi juures 16h.  Tsentrifuugin bakterid põhja  Eemaldan tuubist supernatandi.  Re-suspendeerin bakterisademe E1 lahuses.  Lisan E2 lahuse ja loksutan tuubi  Inkubeerime 2 minutit, kuni lahus muutub selgemaks.  Pipeteerime peale E3 lahuse ja raputame segu.  Tsentrifuugin 5 minutit  Tõstan supernatandi uude tuubi ja lisan sinne isopropanooli.  Tsentrifuugin plasmiidse DNA 10 mini.  Eemaldab supernatandi ja viskan selle ära.  Pesen sadet etanoolidga.  Suspendeerin 30 µl MQs.