Ainete segu lahutamine geelkromatograafia meetodil
mahtu, millega väljuvad molekulid, mis geeli pooridesse ei mahu) ja maksimaalset
elueerimismahtu ( eluaadi mahtu, millega väljuvad need molekulid mis geeli pooridesse
täielikult sisenevad).
Kromatogrammiks nimetatakse eluaadi fraktsioonides sisalduva aine kontsentratsiooni ja
mahu vahelist graafikut.
Kromatografeerimissüsteem koosneb kolonnist, eluendi reservuaarist ja fraktsioonikogurist.
Tihti on kasutusel automaatkolonnid, mis automaatselt lisavad kolonni eluenti, antud töös on
aga kasutusel klaaskolonnid, mis on eelnevalt täidetud pundunud dekstraangeeliga
Sephadex G - 75. Kolonn on kinnitatud statiivile sellisele kõrgusele, et alla mahuks
katseklaas. Käsitsi tuleb lisada nii eluenti kui ka fraktsioone koguda.
Ainete kindlakstegemiseks eluaadi fraktsioonides kasutatakse spektrofotomeetrit.
Töö käik
Kolonni iseloomustamine ja ettevalmistamine
· Kolonn asetataksse statiivile vertikaalselt