Samal ajal kui Anne Boleyn taastus järjekordsest rasedusest, teatas Henry VII, et ta oli meelitatud abielluma. Anne olevat kasutanud nõidust. Ta leidis uue armukese, Jane Semyouri, ning tõi ta kiiresti elama kuninglikku majja. On arvatud, et Anne hukkamise planeeris Thomas Cromwell. Paljud Anne lähikondsed arreteeriti, nende hulgas ka tema vend, keda süüdistati riigireetmises ja verepilastuses. 2. mail 1536 vangistati Annne Boleyn ning ta viidi Tower of Londonisse. Seal kukkus ta kokku ja nõudis, et talle öeldaks tema rikkumised. Kolm päeva hiljem süüdistati teda abielurikkumises, verepilastuses ning riigireetmises. 14. mail kuulutati tema abielu kehtetuks. 17. mai hukati tema vend ja teised arreteeritud. 19. mai hukati Anne Boleyn pea mahalöömise läbi. Hukkamine toimus Prantsuse stiilis. Ta oli 37 aastat vana.