"anioonvahetus" - 1 õppematerjal

Ensümoloogia

Puhta ensüümi eriaktiivsus on seotud katalüütilise konstandi ja molekulmassiga. Teades puhta valgu eriaktiivsust saame jälgida valgu preparatsiooni puhtust. Kui puhastame valgu, siis saame erinevate etappide järgi määrata valgu kontsi lahuses ja selle järgi määrata eriaktiivsust ja seda kõrvutades puhta valgu eriaktiivsusega, siis saame puhtuse % ehk puhtuse astme. Ntx: 100kDa on 100 000g/mol=100 000 mg/mmol=100mg/umol Q Sefaroosi ­ maatriks, mis kannab pos laengut, anioonvahetus. Sefakrüül on suuruse järgi lahutamine. Geelfiltratsiooni miinuseks on see, et ruumala läheb suuremaks, valgulahus lahjeneb ­ see on alati negatiivne. Valku tahetakse saada ikka kontsentreeritult. Valgu puhastamisel ­ mida rohkem etappe, mida vaja teha, seda halvem, sest vigu võib teha rohkem. Ioonvahetuseks peab olema valk õiges puhvris (samas, millega kolonn on tasakaalustatud). Iga ioonvahetuse ette käib puhvrivahetus