Molekulaar- ja rakubioloogia
Figure 2 illusteeriv pilt
4. Praktikum - transfektsioon
Transfektsioon on võõr-DNA (plasmiidid) või RNA (siRNAd) viimine loomarakku.
Transfekteerimiseks kasutatakse erinevaid võimalusi: keemilised meetodid (nt. kaltsiumfosfaat,
katioonsed polümeerid, dendrimeerid, liposoomid ja katioonsed lipiidid) ja füüsikalised
meetodid (nt. elektroporatsioon, sono-poratsioon, optiline transfektsioon, magnetogektsioon,
mikroinjektsioon).
Meie majas on kasutusel ka Amaxa Nucleofector –aparaat, mis kombineerib elektroporatsiooni
ja keemilisi transfekteerimise meetodeid. Võimaldab efektiivsemalt transfekteerida rakke, mis
muude meetoditega hästi ei taha transfekteeruda.
Loomarakkudele mõeldud plasmiid sisaldab:
• komponente, mis võimaldavad plasmiidi bakteris paljundada (origini- prokarüootset
replikatsiooni alguspunkt, antibiootikumi resistentsusgeeni)