Rekombinantsed peptiidid ja kloonimine
Milliseid erinevaid
tüüpi praimereid saab kasutada cDNA sünteesis? Kirjelda, mis on cDNA ja genoomse
DNA kogum (,,library").
cDNA on DNA, mida sünteesitakse mRNA järgi revertaasi abil (pöördtranskriptaas). cDNA sees on
ainult eksonid.
cDNA library - kloonide kollektsioon vektorites, mis on saadud RNA-de koopiatest. Ideaalne
kogum sisaldab kõiki ühe organismi või koe geeni. DNA kogum: sisaldab ideaalselt vähemalt iga
geeni üht koopiat. cDNAd vastavad aktiisetele geenidele, mis kodeerivad valke. Võimaldab
vaadata aktiivseid valke.
Genoomne DNA kogum kõik geenid, geenipank. Saab identsifitseerida. Genoomse kogumi
loomiseks, kasutatakse genoomse DNA lõikamist restriktaasiga ja selle ligeerimine vektorisse:
bakteriofaagid, kosmiidid, BAC ja YAC (Võivad esineda probleemid: geeni lõikamine keskel; geen
on suurem, kui vektor võib vastu võtta. Kasutatakse randoomset lõikamist; ~20kb)
Esineb mitu varianti cDNA sünteesimiseks:
1