Biokeemia praktikumi juhend
seostub spetsiifiliselt mingi uuritava segu komponent. Kõige laialdasemalt kasutatakse
kahte afiinsuskromatograafia liiki:
· immuunoafiinsuskromatograafiat,
· metallkelaat-afiinsuskromatograafiat.
Immuunoafiinsuskromatograafia puhul on statsionaarseks faasiks kandjale seotud
antigeen, mida kasutatakse antikehade eraldamiseks, näiteks, vereseerumist.
Metallkelaat-afiinsuskromatograafia ehk immobiliseeritud metalliiooni afiinsuskromato-
graafia (IMAC, immobilized metal ion affinity chromatography,) põhineb aminohapete
tugevale interaktsioonile metalliioonidega koordinatiivsete sidemete tekkimise kaudu.
Statsionaarseks faasiks on kandjale seotud kelaadi vormis metalliioonid. Enamkasutatavad
on nikkel, koobalt ja vask histidiini sisaldavate valkude puhastamiseks ning raud, tsink või
gallium fosforüülitud valkude ja peptiidide puhastamiseks.