Proteolüütilise ensüümi aktiivsuse määramine
Kui kaseiini lahus on 30 oC-ni soojenenud, alustatakse kaseiini hüdrolüüsi. Selleks
pipeteeritakse kaseiinile juurde 1 ml alkalaasi lahust, loksustatakse ja fikseeritakse aeg kella
järgi. Peale ensüümi lisamist võetakse võimalikult kiiresti 3 ml reaktsioonisegu ning viiakse
esimesse TKÄ-d sisaldavasse latseklaasi (0-proov). Loksutatakse hoolega. Täpselt 5 minuti
pärast korratakse toimingut. Nii kolm korda. Peale viimast proovi aga võtan kolvi
reaktsiooniseguga vesitermostaadist välja.
Katseklaasid proovidega jäetakse täielikuks sademe formeerumiseks 10-15 minutiks seisma.
Sel ajal pannakse valmis 4 puhast ja kuiva katseklaasi ning varustatakse need sobivate lehtrite
ning filterpaberitega.
Proovid filtritakse kuivadesse katseklaasidesse. Filtrile jäänud sade pole vajalik. Filtraadid
peavad aga olema täiesti selged. Seejärel määratalse spektrofotomeetril nende optiliste
tiheduse väärtused (D280), kasutades 1 cm läbimõõduga kvartskvürette.
annaabi.ee 
