Ainete segu lahutamine geelkromatograafia meetodil
Täidise kõrgus
kolonnides on tavaliselt 25-30 cm, täidise kohal reeglina 3-4 cm paksune vaba eluendi kiht. Eluendi
lisamine kolonni ja fraktsioonide kogumine toimub käsitsi.
Antud töös kasutatakse spektrofotomeetrilist meetodit.
Töö käik:
Kolonni iseloomustamine ja ettevalmistamine
·Kontrollisin kolonni vertikaalsust, asendit korrigeerida polnud vajalik.
·Kolonnis oleva Sephandex'i mark: Sephandex G75 fraktsioonimispiirkond 3000-80000 D, k=0.1
(väärtus sõltub kasutatava geeli pundumisastmest)
·Mõõtsin geelisamba kõrguse L ja diameetri,kasutades sobivat joonlauda.n L=28cm; d=2.2cm.
·Arvutasin täidise kogumahu Vt= r 2 *L= *1.1²*28=106 cm³
·Arvutasin geelimaatriksi mahu Vg=k*Vt=0.1*106=10.6 ja sellest lähtuv kolonni iseloomustav
maksimaalne elueerimistmaht Vx;max=Vt-Vg=106-10.6=95.4
·Arvutasin fraktsioonide üldarvu, arvestan kindlaks mahuks 2ml. n=Vx;max/2=95.4/2=47.7