"resiin" - 1 õppematerjal

Geenitehnoloogia eksam

aega. Suuremad molekulid seevastu terakeste sisse ei mahu ja liiguvad läbi terakestevahelise ruumi kiiresti kolonnist välja. Selleks ajaks, kui ka väikesed valgud kolonnist välja hakkavad jõudma, on suured kolonnist ammu lahkunud ning jällegi on saavutatud osade valkude eraldamine teistest. Afiinsuskromatograafia- huvipakkuv valk võib mõnda väikest molekuli (nn.ligandi) väga tugevasti ja spetsiifiliselt siduda (s.t. teised valgud seda molekuli ei seo). Sünteesitakse resiin, mille küljes see molekul on ning voolutatakse valkude segu läbi resiini nagu teiste kromatograafialiikide puhul. Kolonni jääb kinni ainult meid huvitav valk. Nüüd muudetakse kas lahusti pH-d (valk-ligand seondumine sõltub lahuse pH-st) või lisatakse lahusesse mõnda teist ligandi, mis seondub valguga samast kohast, kus resiini küljes olev ligandki. Tulemusena tuleb huvipakkuv valk resiini küljest lahti ning väljub kolonnist. 45. Valkude struktuuri uurimise meetodid. 46