Geenitehnoloogia arvestus I semester
PCR käigus viiakse DNA süntees läbi keskmiselt 20-40 korda järjest. Iga
sünteesireaktsioon moodustab ühe “PCR tsükli”. Tsükkel koosneb sisuliselt
kindlatest temp-muutustest, mis korduvad ja kus kindla temp. Juures leiab aset
kindel osa DNA sünteesi reaktsioonist.
Klassikaliselt koosneb 1 tsükkel kolmest erinevast protsessist kolmel erineval temp-
il:
1. Enne kui saab alata DNA süntees, on vaja praimerite seondumine. Praimerid
ei suuda aga seonduda kaksikheeliski kujul olevale DNA-le. Seetõttu on
esimeseks etapiks DNA ahelate “lahti sulatamine” ehk denatureerimine →
kuumutatakse segu lühidalt (20-30 sek) 94-98 kraadi juures. Sellisel temp-il
katkevad H-sidemed, mis hoiavad DNA molekuli lämmastikaluseid koos ning
kaksikahelisest DNA molekulist saab kaks üheahelalist DNA molekuli.
2. Üheahelalisele DNA molekulile saaks nüüd seostuda praimer aga nii kõrge
temp