Geenitehnoloogia arvestus I semester
il:
1. Enne kui saab alata DNA süntees, on vaja praimerite seondumine. Praimerid
ei suuda aga seonduda kaksikheeliski kujul olevale DNA-le. Seetõttu on
esimeseks etapiks DNA ahelate “lahti sulatamine” ehk denatureerimine →
kuumutatakse segu lühidalt (20-30 sek) 94-98 kraadi juures. Sellisel temp-il
katkevad H-sidemed, mis hoiavad DNA molekuli lämmastikaluseid koos ning
kaksikahelisest DNA molekulist saab kaks üheahelalist DNA molekuli.
2. Üheahelalisele DNA molekulile saaks nüüd seostuda praimer aga nii kõrge
temp. Juures ei ole see võimalik (H-sidemeid ei hoia kaht ahelat koos sellisel
temp-il). Tuleb temp. Alandada. Segu jahutatakse kiiresti mõnekümneks sek
50-60kraadini ja lahuses olevad praimerid saavad paarduda DNA külge. DNA
paljundamise spetsiifika tagataksegi just sellega, et kummalegi praimerile on