Valgud ja sellega seonduv
Isoleeritud valku puhust tuleb testida mitme erineva meetodiga. Puhastamiseks on põhiprotseduurid: materjali
homogeniseerimine,tsentrifuugimine tiheedusgradiendis,fraksineerimine, puhastamine lisandeist, kõrgeselektiivne
puhastamine, kontroll.
Homogeniseerimine- kudede ja rakkude peenestamine üheks massiks klaasist kolhomogenisaatoriga, lõikenugadega
homogenisaatoriga. Homogeniseerimissegu : 1osa koematerjali 10 osa 0,25M sahharosii lahust. Lisakse veel detergente,
kaitsvaid aineid. Homogenaat filtreeritakse ja allutatakse diferentsiaaltsentrifuugimisele.
Deferentsiaaltsentrifuugimine- võimaldavad saada poolpuhtaid rakuorganellide fraktsioone. Tema tsentrifugaaljõu
astmeline rakendamine lahustamaks partikleid sedimentatsioonikiiruste alusel. 3 erinevaid astmed: väike
kiirus(5000),keskmine(20000) ja suur kiirus(100000). Ei anna puhtalt fraktsioone. Eesmärkideks haiguste patogeneesi
molekulaarmehhaniismide ruvastamine, uute raviainete toksilisuse,midabolismi hindamine
11