Geenitehnoloogia arvestus I semester
kuumutatakse segu lühidalt (20-30 sek) 94-98 kraadi juures. Sellisel temp-il
katkevad H-sidemed, mis hoiavad DNA molekuli lämmastikaluseid koos ning
kaksikahelisest DNA molekulist saab kaks üheahelalist DNA molekuli.
2. Üheahelalisele DNA molekulile saaks nüüd seostuda praimer aga nii kõrge
temp. Juures ei ole see võimalik (H-sidemeid ei hoia kaht ahelat koos sellisel
temp-il). Tuleb temp. Alandada. Segu jahutatakse kiiresti mõnekümneks sek
50-60kraadini ja lahuses olevad praimerid saavad paarduda DNA külge. DNA
paljundamise spetsiifika tagataksegi just sellega, et kummalegi praimerile on
DNA ahela peal inult üks võimalik seondumiskoht – praimer on teadlikult
sünteesitud sellisena, et ta ei oleks ühegi teise DNA piirkonnaga
komplementaarne.
3. Kui praimerid seondunud → vaba 3' DNA ots, kust saab alata DNA süntees.
Lisaks praimeritele ja DNA-le peavad sellele segule lisatud olema DNA