Molekulaar- ja rakubioloogia
BSA lahjendusterea ettevalmistus
1. Võta 5 epsi, kirjuta peale kontsentratsioonid
2. Pipeteeri igasse 50 µl lüüsipuhvrit
3. Võta 50 µl BSA 2 mg/ml lahust ja lisa esimesse epsi, suspendeeri korralikult.
4. Tõsta sama otsikuga 50 µl lahust järgmisse epsi ja suspendeeri.
5. Korda tegevust, kuni oled jõudnud 0,125 mg/ml epsini.
6. Viimasesse epsi jääb puhas puhver, ära sinna midagi juurde pane.
Oma proovi ettevalmistus
Tsentrifuugisin valguprepsi 1 minut max pööretel. Tegin uude epsi 2x lahjenduse 15 µl
lüsaati ja 15 µl puhvrit.
Reaktsiooni kokkusegamine
Lisa iga proovi 5 µl kahte auku. Raputa plaati segamiseks, aurumise vältimiseks kata plaat
teibi või kaanega. Inkubeeri 37 kraadi juures 30 minutit. Mõõda neeldumist 562 nm juures.
Meie proovid on näha B-reas 1-4.
y = 0,2601x + 0,1567
Kontsentreeritud:
0,2502 0,2345
2x lahjendus:
0,1833 0,19
Valgu kontsentratsioonid:
1) 0,359
2) 0,299