· Kalibrimisgraafikut kasutades leitakse proovide optiliste tiheduste järgi nendes sisalduva türosiini kontsentratsioon. · Saadud andmete alusel koostame graafik, mis väljendub türosiini kontsentratsiooni ja reaktsiooni kestvuse vahelist sõltuvust. (Ctyr=f(t)). · Leiame ensüümipreparaadi proteolüütilist aktiivsust(A), kasutade antud valemi: A= Ctyr 103 V1 V2 2/t 181 V3 g Kus: Ctyr -türosiini kontsentratsiooni muudus valiud ajavahemikus (mg/ml) t -hüdrolüüsi kestus (s) V1 -reaktsoonisegu üldmaht (ml) V2-valmistatud ensümilahuse üldmaht (ml) 2 TKÄlahusest tingitud proovi lahjendus V3- ensüümi maht hüdrolüsisegus (ml) g - proteaasi preparaadi kaalutis (g) 181 türosiini molekullmass. Töö tulemused.
Proovid filtritakse, kusjuures sade peab olema täiesti selge ning filtrile jäänud sade pole enam vajalik. Spektrofotomeetril määratakse nelja erineva proovi optilise tiheduse väärtused lainepikkusel 280 nm, kasutades 1 cm läbimõõduga kvartsküvette. Tulemused: 0-proov A= 0,539 CTyr 0,085 mg/ml 5 min proov A= 0,651 CTyr 0,103 mg/ml 10 min proov A= 0,779 CTyr 0,124 mg/ml 15 min proov A= 0,945 CTyr 0,151 mg/ml A= (CTyr * 103 * V1 * V2 * 2) / t * 181 * V3 * g CTyr türosiini kontsentratsiooni muutus valitud ajavahemikus (mg/ml) (0,061 mg/ml) V1 reaktsioonisegu üldmaht (26ml) V2 valmistatud ensüümilahuse üldmaht (5ml) 2 TKÄ lahusest tingitud proovi lahjendus t hüdrolüüsi kestus (900s) 181 türosiini molekulmass V3 ensüümi maht hüdrolüüsisegus (1 ml) G proteaasi preparaadi kaalutis, g (0,0078g) Kui arvutada ilma graafikuta: A= (CTyr * 103 * V1 * V2 * 2 )/ t * 181 * V3 * g =
Pikkus Kaal Pikkus Kaal (cm) (kg) järjestatult järjestatult 176 78 165 70 Aritmeetiline keskmine 182.4 average Aritmeetiline keskmine 79.49 168 72 167 70 Harmooniline keskmine 181.94466 harmean Harmooniline keskmine 79.056381 178 70 168 70 Geomeetriline keskmine 182.17247 geomean Geomeetriline keskmine 79.27278 195 72 168 70 Miinimum 165 min Miinimum 70
20 25 30 2) kaalu ja pikkuste korrelatsioon x y 50 160 51 164 53 165 54 166 55 167 60 170 62 172 63.9 173 65 173 65 173 68 175 70 175 73 176 74 178 77 181 82 183 83 186 90 193 matemaatika eksamitulemused 30 35 40 45 50 55 Punktide arv kaalu- ja pikkustevaheline seos 200 195 P 190 i k 185 k u 180 s 175 ( c 170 m ) 165 160 155 c 170 m ) 165 160 155 150
Vastutab, viie aasta jooksul. Vastutus lõpeb alles, siis kui on registrist kustutatud. ÜL 137. Joonatan saab osanikuks siis, kui on tehtud uus avaldus, et teha kanne Äriregistrisse. $ 83 lõige 4. $ 102 lõige 1. Vastutab küll. ÜL 138. $ 9 lõige 2. E i või, $ 86 lõige 3. Vara kuulub täisühingule ÜL 139. ÜL140. $ 149 lõige 1. Koosseisu mõjutab nii, et ühingusse jääb ainult osanik. ÜL 141. ÜL 142. Ei ole võimalik ÜL 143. Võib sisse kanda, kuna $ 147 lõige 2 ÜL 144. $ 181 lõige 1. Kui põhikirjas ei ole midagi mainitud, on tema esindus täielik. Kui nimetada veel üks juahtuse liige, siis nad võivad mõlemad eraldi esindada või kui nad koos soovivad, siis nad saavad seda teha siis, kui nad on selle ära märkinud põhikirjas. ÜL 145. On võimalik, aga on vaja muuta põhikirja. $ 175 lõige 1,2 ÜL 146. On kooskõlas, $ 181 ÜL 147. On küll, $ 181 lõige 1. ÜL 148. Ei ole võimalik, tuleb põhikirja muuta või kohe teine juhatuse liige määrata. ÜL 149
sirge. Andmed Aeg (min) Optiline tihedus ABS Tyr konsentratsion (mg/ml) 0 0,426 0,067 5 0,554 0,089 10 0,769 0,121 15 0,920 0,145 Graafik Arvutus A = CTyr · 103 · V1 · V2 · 2 / t · 181 · V3 · g A1=(0,089-0,067)*1000*26*5*2/300*181*1*0,0075=25,88 kat/g A2=(0,121-0,089)*1000*26*5*2/300*181*1*0,0075=37,65 kat/g A3=(0,145-0,121)*1000 *26*5*2/300*181*1*0,0075=28,24 kat/g Kokkuvõte Teoreetiliselt peavad katses saadud Tyr konsentratrsioonid olema ühel sirgel. Oma graafiku järgi võin öelda, et minu katsetulemused on natulene ebatäpsed. Seda võib põhjustada liiga aeglane katse tegemine, ebatäpsed reaktsioonisegu kogused ning ebatäpne aja jälgimine
2. KIVISIKK 123 21,55 2650,65 88,143 2562,507 3. JÄNES 182 23,52 4280,64 446,7408 3833,8992 4. OINAS 167 20,31 3391,77 251,1894 3140,5806 5. SOO 153 25,05 3832,65 348,183 3484,467 6. JÄRVI 165 28,35 4677,75 534,105 4143,645 7. AATOS 181 18,9 3420,9 257,598 3163,302 8. PADAR 134 25,2 3376,8 247,896 3128,904 9. MUST 171 24,48 4186,08 425,9376 3760,1424 10. PEEBO 142 32,15 4565,3 509,366 4055,934 11. AABRAM 165 28,35 4677,75 534,105 4143,645 12. ISOP 181 18,9 3420,9 257,598 3163,302 13
168 72 167 70 178 70 168 70 195 72 168 70 169 81 168 70 199 75 169 70 192 84 169 70 179 84 169 71 180 80 169 71 188 70 169 72 192 73 169 72 181 78 169 72 188 72 170 72 196 81 171 73 172 73 172 73 168 89 172 73 170 89 172 73 189 84 172 73 188 81 172 73 187 87 172 73 192 73 173 73 184 84 173 73
Marek m 176 43 Elo n 163 36.5 Rivo m 178 42 Jaan m 185 45 Martin m 180 43 Andrus m 187 45 Terje n 162 37 Kristi n 157 36.5 Maris n 162 39 Tuuli n 173 39 Marek m 181 43 Krista n 168 38 Hanneloore n 173 37.5 Andres m 186 45 Andres m 192 45.5 Meelis m 188 44 Silver m 167 43 Roger m 172 41 Ain m 178 43 Kaupo m 186 44 Tarmo m 180 42 Veiko m 190 44.5
C0 = ei määranud, kuna mõõtmis tulemus ei sobinud, st 0-proovi optiline tihedus oleks pidanud väiksem olema kui I proovi oma. C1 = 0,091 mg/ml C2 = 0,094 mg/ml C3 = 0,12 mg/ml Saadud andmete alusel koostan graafiku: türosiini kontsentratsioon (C) aeg (t). Arvutan preparaadi proteolüütilise aktiivsuse vastavalt järgmisele valemile: A = C * V1 * 2 * 103 * V2 t * 181 * g * V3 kus C = 0,115-0,085 = 0,03 mg/ml t = 800-350 = 450 s V1 (hüdrolüüsisegu üldmaht) = 26 ml V2 (ensüümilahise üldmaht) = 5 ml V3 (ensüümi maht hüdrolüüsisegus) = 1 ml g (proteaasi kaalutis) = 0,0051 g M (türosiini molekulmass) = 181 g/mol TKÄ lahusest tingitud lahjendus = 2 A = 0,03 * 26 * 2 * 103 * 5 = 18,78 kat/g 450 * 181 * 0,0051* 1 Kokkuvõte: 30 oC juures on alkalaasi aktiivsus 18,78 kat/g, st 1 sekundi jooksul hüdrolüüsiti 18,78
Hüdrolüüsi produktide sisaldus avaldatakse türosiini mikromoolidena. Õppejõult saadud kaliibrimisgraafiku alusel sain türosiini kontsentratsiooniks: C 0 =0,06 mg/ml 0s C1 =0,09 mg/ml 300s C 2 =0,1370mg/ml 600s C 3 =0,1840mg/ml 900s Arvutan preparaadi proteolüütilise aktiivsuse vastavalt järgmisele valemile: C 10 3 V1 2 V 2 A= t 181 V3 g Kus: C - türosiini kontsentratsiooni muutus mg/ml: 0,1840-0,098=0,086mg/ml t - hüdrolüüsi kestvus s: 900-300=600s V1 - hüdrolüüsisegu üldmaht ml: 26ml 2- TKÄ lahusest tingitud lahjendus V 2 - ensüümilahuse üldmaht ml: 5ml V 3 - ensüümi maht hüdrolüüsisegus ml: 1ml g- proteaasi kaalutis: 0,006g 181- türosiini molekulmass. Pannes arvud valmeisse saan: 0,086 10 3 26 2 5 A= = 34,32 kat/g
Minimaalne Nimi pikkus 1997 1998 1999 2000 2001 2002 Ats 174 174 175 176 178 180 174 Kalle 169 171 173 173 174 174 169 Mati 179 180 181 181 182 182 179 Ants 160 160 170 170 174 174 160 Keskmine 170,5 171,25 174,75 175 177 177,5 170,5 Atsi pikkuse muutumine aastatel 1997 kuni 1999 1 Kalle pikkuse muutumine aastatel 1998 kuni 2002 3 Mati pikkuse muutumine aastatel 1999 kuni 2001 1
ja filtripaberitega katseklaasi. 6. Filtrisime lahused ära ja saadud läbipaistvatel filtraatidel mõõtsime optilise tiheduse fotospektromeetril laine pikusel 280,0 nm. 4. Arvud ja arvutused: Leiame optiliste tiheduste abil kaliibrimis graafikult türosiini kontsentratsioonid. Siis tehakse graafiku Türosiini konts. aeg. Ja veel lisaks arvutatakse kontsentratsiooni vastavalt valemile: A = delta C x 103 x V1 x 2 x V2 / delta T x 181 x V3 x g deltaC - turosiini kontsentratsiooni muutus mg/ml delta T - hudroluusi kestus s V1 - hudroluusisegu uldmaht ml 2 - TKÄ lahusest tingitud lahjendus V2 - ensuumilahuse uldmaht ml V3 - ensuumi maht hudroluusisegus ml g - proteaasi kaalutis g 181 - turosiini molekulmass
5. 184 75 33856 5625 13800 6. 185 74 34225 5476 13690 ∑ X 2i i=1 X 2= 7. 190 88 36100 7744 16720 N 8. 192 75 36864 5625 14400 9. 185 75 34225 5625 13875 10. 181 75 32761 5625 σ X =√ X − X 13575 2 2 11. 172 75 29584 5625 12900 12. 183 79 33489 6241 14457 σ Y =√ Y −Y 13. 179 70 32041 4900 12530 2 2 14. 196 110 38416 12100 21560 15
9 180:59:11 180:59:12 +1,306 +0,029 5852,761 11880,394 9 +0:00:01 105:51:34 450,000 -122,975 +432,871 -121,670 +432,899 10 181:16:38 181:16:39 +1,397 +0,031 5731,091 12313,293 10 +0:00:01 107:08:13 481,555 -141,893 +460,176 -140,496 +460,206 11 182:20:12 182:20:13 +1,686 +0,037 5590,595 12773,500 11
Laboratoorne töö IV Üliõpilane: Meelika Lukner (155308) Kuupäev: 08.04.2016 Proteolüütilise ensüümi aktiivsuse määramine Proteolüütilised ensüümid (ka proteaasid, proteinaasid või peptidaasid) on ensüümid, mis katalüüsivad proteolüüsi. Proteolüüs on peptiidsidemete hüdrolüüs valkudes ja peptiidides, mille tulemuseks on madalama molekulmassiga peptiidid ja aminohapped. Kuna proteaas täidab väga paljusid füsioloogilisi funktsioone, leidub seda kõikides organismides. Mõned protelüütilised ensüümid lõhustavad spetsiifilisi peptiidsidemeid (piiratud proteolüüs), mida viivad läbi näiteks trüpsiin, kümotrüpsiin ja pepsiin, ja mõned lõhustavad kõiki peptiidsidemeid (piiramatu proteolüüs), milleks on näiteks paljud bakteriaalsed proteaasid nagu subtilisiin, savinaas, alkalaas jt. Proteaase jagata...
Trafaretikulu 70 500 Tootmistsehhi pidamisega seotud kulud (küte, elekter) 35 000 Põhimaterjalikulu 160 500 Abitööliste ja teenindava personali palgakulu 84 000 Põhitööjõukulu 500 Masinate ja seadmete rentimine 50 000 Kokku 161 000 TLK kokku 181 000 Kulujaotusbaasina on materjalikulu. Siis arvutame tootmise lisakulude määra. Tootmise lisakulude määr = Tootmise eelarvestatud lisakulud / Eelarvestatud põhikulud Tootmise lisakulude määr = 181 000 / 160 500 = 1,13 kr Tellimuse maksumus: Otsekulud + Kaudkulud = Kogukulu ehk 161 000 + 5 650 = 166 650 Ühe pastaka tootmisomahind = 166 650 / 5 000 = 33,33 kr Ülesanne 2 Predetermined overhead rate Department 1: Overhead cost / Direct labor hours = 250 000 / 100 000 = 2,5 kr/h
181 – türosiini molekulmass (0, 043 0, 025)mg / ml 103 26ml 10 ml 2 0, 018mg / ml 103 26ml 10ml 2 A (900 300) s 181g / mol 1ml 0, 012 g g / mol 1ml 0, 012 600s 181 g 7,1823 kat / g Arvutan sirge tõusu k=0,00003 järgi võttes ajaühikuks 1 sekundi: 0, 00003mg / ml 103 26ml 10 ml 2 A 7,1823 kat / g 1s 181g / mol 1ml 0, 012 g A 7,1823 kat/g Järeldus Alkalaasi proteolüütiline aktiivsus A on 7,1823 μkat/g. Kuigi minu katse 0-proov ebaõnnestus, on ülejäänud 3 tulemust graafikul samal sirgel, mis näitab, et katse
· spektrofotomeetril määrasin nelja, erineval ajal reaktsioonisegudest võetud proovi optilise tiheduse väärtused lainepikkusel 280 nm · kaliibrimisgraafikult leidsin vastavalt proovide optiliste tiheduste väärtustele neis sisalduva türosiini kontsentratsioonid Saadud katseandmete alusel koostasin järgneva graafiku, mis väljendab türosiini kontsentratsiooni ja reaktsiooni kestvuse vahelist sõltuvust A = CTyr * 103 * V1 * V2 * 2 / t * 181 * V3 * g CTyr - türosiini kontsentratsiooni muutus valitud ajavahemikus (mg/ml) t - hüdrolüüsi kestus st valitud ajavahemik (s) V1 - reaktsioonisegu (substraat + ensüüm) üldmaht (ml) V2 - valmistatud ensüümilahuse üldmaht (ml) 2 - TKÄ lahusest tingitud proovi lahjendus V3 - ensüümi maht hüdrolüüsisegus (ml) g - proteaasi preparaadi kaalutis (g) 181 - türosiini molekulmass Katseandmed: Katseklaa Aeg t (sekundites) D280 CTyr (mg/ml) s nr.
PINGEKONTSENTRATSIOON on liite servades. Rebimisel lisandub liite serval täiendav tõmbepinge. 17. Teha skitse liimliidete põhitüüpidest, mis tagavad tugeva liite. 178. 18. Mis on optimaalseks liimikihi paksuseks? 179. Liimikihi OPTIMAALNE PAKSUS on tavaliselt (0,05 ... 0,15) mm. 19. Kuidas teostatakse katteliimliite tugevusarvutust (valemid koos seletustega)? 180. 181. 181. 181. 181. 181. 181.
Tallinna Tehnikaülikool Biokeemia Laboratoorne töö 3.2 Teostaja: 2016 3.2 Proteolüütilise ensüümi aktiivsuse määramine Proteolüütilised ensüümid ehk proteaasid, on ensüümid, mis katalüüsivad peptiidsidemete hüdrolüüsi reaktsiooni valkudes ja peptiidides, produtseerides madalama molekulmassiga peptiide ja vabu aminohappeid. Proteaase leidub kõikides organismides, nad seedivad näiteks toiduvalke. Erinevad proteaasid omavad ka erinevat toimespetsiifikat. Mõned proteolüütilised ensüümid lõhustavad vaid teatud aminohapetega külgnevaid peptiidsidemeid (piiratud proteolüüs). Sellised on näiteks trüpsiin, kümotrüpsiin ja pepsiin, mis produtseerivad põhiliselt peptiide. Samas paljud bakteriaalsed proteaasid, nagu näiteks subtilisiin, savinaas, alkalaas, omavad väga nõrka spetsiif...
reaktsiooni kestvuse vahelist sõltuvust CTyr = f(t). Graafikult on näha, et türosiini kontsertatsioon kasvab ajas. Sirge ei läbi y-telje nullpunkti, sest kaseiin sisaldab TKÄ-ga mittesadenevaid kompenente, mistõttu on türosiini vähesel määral ka 0-proovis. Graafiku järgi on sellele ajavahemikule vastav kontsentratsiooni muut C = 0,13080,0601 = 0,0707 mg/ml. C 10 3 V1 2 V2 A= t 181 V3 g mg C türosiini kontsentratsiooni muut ml = 0,0707 t hüdrolüüsi kestus sekundites 900 s V1 hüdrolüüsisegu üldmaht ml 25 ml kaseiini + 1 ml ensüümipreparaati = 26 ml 2 TKÄ lahusest tingitud lahjendus V2 ensüümilahuse üldmaht ml 5 ml V3 ensüümi maht hüdrolüüsisegus ml 1 ml g proteaasi kaalutis grammides - g = 0,0075 181 türosiini molekulmass 0,0707 103 26 2 5
· Spektrofotomeertil määrasin proovide optilised tihedused lainepikkusel 280nm, kasutades 1cm läbimõõduga kvartsküvette. Optilised tihedused · Null lahus 0,190 0,03mg/ml · 5 min lahus 0,312 0,049mg/ml · 10 min lahus 0,438 0,07mg/ml · 15 min lahus 0,583 0,092mg/ml Graafiku abiga leidsin neile tiheduse väärtustele vastavad konsentratsioonid Proteaasi aktiivsuse arvutamine A = [CTyr · 103 · V1 · V2 · 2] / [t · 181 · V3 · g] CTyr = [C1 C0 + C2 C1 + C3 C2 ] / 3 CTyr = [0,049 0,030 + 0,070 0,049 + 0,092 0,070] / 3 = 0,02mg/ml A = [0,02 · 103 · 5 · 26 · 2] / [300 · 181 · 0,0076 · 1] = 12,6kat/g Analüüs Kuna kõik punktid asuvad peaaegu ühel joonel siis võib lugeda katse edukaks. Vähest kõikumist võis tuleneda aja ebatäpsest fikseerimisest. (Algul ei tahtnud süstlaga pipeteerimine nii kiiresti välja tulla, kui viimaseid proove pipeteerides)
I katseklaas 0,068 mg/ml II katseklaas 0,09 mg/ml III katseklaas 0,117 mg/ml IV katseklaas 0,145 mg/ml C(Tyr)=f(t) 0.16 0.14 0.12 0.1 C(Tyr) 0.08 0.06 0.04 0.02 0 0 2 4 6 8 10 12 14 16 Ensüümipreparaadi proteolüütiline aktiivsus arvutati valemile: A = CTyr · 103 · V1 · V2 · 2 / (t · 181 · V3 · g) CTyr = 0,055 mg/ml t = 600 s V1 = 26 ml V2 = 5ml 2 TKÄ lahusest tingitud proovi lahjendus (3 ml o 6 ml, seega L = 2), V3 = 1ml g = 0,01g 181 türosiini molekulmass. A=13,2 µkat/g Kokkuvõte Kuna türosiini kontsentratsiooni muutuvuse graafik ajas tuli peaaegu sirge, olid mõõtmistulemused õiged. Täielikult täpsete mõõtmistulemuste kohaselt oleksid kõik 4 punkti graafikul asuma ühel sirgel. Alkalaasi proteolüütiline aktiivsus oli 13,2 µkat/g
· Spektrofotomeertil määrasin proovide optilised tihedused lainepikkusel 280nm, kasutades 1cm läbimõõduga kvartsküvette. Optilised tihedused · Null lahus - 0,0281 0,045mg/ml · 5 min lahus 0,343 0,057mg/ml · 10 min lahus 0,411 0,065 mg/ml · 15 min lahus 0,493,9 0,076 mg/ml Graafiku abiga leidsin neile tiheduse väärtustele vastavad kontsentratsioonid. Proteaasi aktiivsuse arvutamine A = [CTyr · 103 · V1 · V2 · 2] / [t · 181 · V3 · g] CTyr = [C1 C0 + C2 C1 + C3 C2 ] / 3 CTyr = [0,055 0,045 + 0,067 0,055 + 0,078 0,068] / 3 = 0,01mg/ml A = [0,01 · 103 · 5 · 26 · 2] / [300 · 181 · 0,0075 · 1] = 6,3kat/g Tulemuste analüüs Kuna kõik punktid graafikul asuvad peaaegu ühel joonel, siis võib lugeda katse edukaks. Vähest kõikumist võis tuleneda aja ebatäpsest fikseerimisest, esimeste proovide puhul võis minna aega natuke rohkem üle, kuna
Preparaadi proteolüütiline aktiivsus A (µkat/g) Kust selline C väärtus? Milline on tegelikult C, mis vastab hüdrolüüsi kestvusele 300 sekundit? C türosiini kontsentratsiooni muutus mg/ml 0,078-0,064=0,014 t hüdrolüüsi kestus s 600 sek V1 hüdrolüüsisegu üldmaht ml 26 ml 2 TKÄ lahusest tingitud lahjendus 2 V2 ensüümilahuse üldmaht ml 5 V3 ensüümi maht hüdrolüüsisegus ml 1 g proteaasi kaalutis g 0,0049 181 türosiini molekulmass. 181 - 9,77 mikrokatalit grammi kohta 1 g ensüümi katalüütiline aktiivsus on 9,77 katalit. ? Mis toimub 1g ensüümipreparaadi toimel? PARANDUSED: Töö oli küll eeskirja järgselt läbi viidud, kui aktiivsus on umbes 3 korda madalam tegelikkusest. Ilmselt on tulnud kusagile viga töö käigus. 6,84 µkat/g 1 g ensüümi katalüütiline aktiivsus on 6,84 katalit 1 g ensüümpreparaadi toimel hüdrolüüsub 6,84 µmooli peptiidsidemeid sekundis.
2 Vastavalt optilise tiheduse väärtusele leian kalibreerimisgraafikult proovides sisalduva türosiini kontsentratsiooni. Katseandmete põhjal koostatakse graafik. Jälgitakse, et see moodustaks ühtlase sirge. Andmed Türosiini kontsentratsioon C (mg) 0.022 0,033 0,05 0,069 Graafik on illustratiivne, sest empiiriline graafik ei andnud rahuldavaid tulemusi. Arvutus: A = CTyr · 103 · V1 · V2 · 2 / t · 181 · V3 · g A1 = (0,069-0,022)*1000 * 26 * 5 * 2/ 916 * 181 * 1 *0,02 = 3,68 kat/g A2 =3,56 kat/g A3 = 3,44 kat/g Katseandmed tulid sarnased, katse võib lugeda õnnestunuks. Kokkuvõte ja järeldused Teoreetiliselt peaksid katses saadud türosiini kontsentratsioonid graafikul kanduma ühele sirgele. Käesoleva katse empiirilised andmed erinevad veidi . Selle põhjuseks võivade eelkõige olla: · proteolüütilise ensüümi tahke preparaadi vähene lahustumine puhvris
Tallinna Tehnikaülikool 3.2 Proteolüütilise ensüümi aktiivsuse määramine Liina Reimann 134537KATB Proteolüütilised ensüümid ehk proteaasid on ensüümid, mis katalüüsivad peptiidsidemete hüdrolüüsi valkudes ja peptiidides, produtseerides madalama molekulmassiga peptiide ja vabu aminohappeid. Proteaase leidub kõikides organismides, nad seedivad näiteks toiduvalke. Mõned proteolüütilised ensüümid lõhustavad eelistatult spetsiifilisi, vaid teatud aminohapetega külgnevaid peptiidsidemeid (piiratud proteolüüs), teised toimivad kõikidele peptiidsidemetele (piiramatu proteolüüs). Piiratud proteolüüsi viivad läbi näiteks trüpsiin, kümotrüpsiin, pepsiin, mis produtseerivad enamasti peptiide. Subtilisiin, savinaas ja alkalaas on bakteriaalsed proteaasid, mis lagundavad praktiliselt kõiki peptiidsidemeid, produtseerides vabu am...
aminohapete sisalduse alusel (nt türosiin, fenüülalaniin, trüptofaan). Neeldusmismaksimumid UV-piirkonnas asuvad lainepikkustel 270-280 nm, mistõttu on nad spektrofotomeetriliselt hõlpsasti detekteeritavad. Reaktsionisegu proovides mõõdetakse kindla lainepikkusega valguskiirguse neelduvust ehk optilist tihedust (D)/absorptsiooni (A). Kaseiini hüdrolüüsi produktide sisaldus väljendatakse türosiini kontsentratsioonina mg/ml või mikromooli/ml (1 mikromool = 181 mikrogrammmi = 0,181 mg), kuigi lahuses võib olla ka teisi aromaatse tuumaga aminohappeid. Antud kaliibrimissirge abil leitakse A väärtuste järgi türosiini kontsentratsioon kindlatel aegadel reaktsioonisegust võetud proovides. Töö käik Töölahuse valmistamine: Valmistada uuritavast proteaasi preparaadist ensüümile sobiva pH-ga puhvris lahus, milles ensüümi kontsentratsioon on vahemikus 1-5 mg/ml. Arvutada välja ensüümipreparaadi kaalutise suurus
aminohapete sisalduse alusel (nt türosiin, fenüülalaniin, trüptofaan). Neeldusmismaksimumid UV-piirkonnas asuvad lainepikkustel 270-280 nm, mistõttu on nad spektrofotomeetriliselt hõlpsasti detekteeritavad. Reaktsionisegu proovides mõõdetakse kindla lainepikkusega valguskiirguse neelduvust ehk optilist tihedust (D)/absorptsiooni (A). Kaseiini hüdrolüüsi produktide sisaldus väljendatakse türosiini kontsentratsioonina mg/ml või mikromooli/ml (1 mikromool = 181 mikrogrammmi = 0,181 mg), kuigi lahuses võib olla ka teisi aromaatse tuumaga aminohappeid. Antud kaliibrimissirge abil leitakse A väärtuste järgi türosiini kontsentratsioon kindlatel aegadel reaktsioonisegust võetud proovides. Töö käik Töölahuse valmistamine: Valmistada uuritavast proteaasi preparaadist ensüümile sobiva pH-ga puhvris lahus, milles ensüümi kontsentratsioon on vahemikus 1-5 mg/ml. Arvutada välja ensüümipreparaadi kaalutise suurus
Osoonikihi hõrenemine Katrin Aibast 12.B Osoonikiht O 2022 km kõrgusel umbes 3 mm paks ehk 300 DUd (Dobsoni ühikut) märtsisaprillis kõige paksem oktoobrisnovembris kõige õhem maailmas max 675 DUd Antarktika kohal 100 DUd 181 DU (20. dets 2007) Osoonikihti kahandavad ained kloori ja broomiühendid nagu klorofluorosüsivesinikud (CFC) haloonid freoonid jt kemikaalid külmutusseadmetes, aerosoolides, tulekustutites, lahustites, kahjuritõrjes Tagajärjed mittemelanoomne nahavähk silmakae immuunsüsteemi nõrgenemine, mistõttu hakkavad levima ka nakkushaigused toiduteravilja saagikuse langemine Kaitse 1985
kontsentratsiooni. Katseandmete põhjal koostatakse graafik. Jälgitakse, et see moodustaks ühtlase sirge. Andmed Türosiini kontsentratsioon C (mg) 0.0049 0,0029 0,0027 0,0053 Graafik on illustratiivne, sest empiiriline graafik ei andnud rahuldavaid tulemusi. Arvutus: A = CTyr · 103 · V1 · V2 · 2 / t · 181 · V3 · g A1 = (0,0049-0,0029)*1000 * 26 * 5 * 2/ 300 * 181 * 1 *0,0051 = 1,878 kat/g A2 =0,9930 kat/g A3 = 0,1204 kat/g Katseandmed peaksid tulema sarnased, paraku aga on
11.Klass 1870. aastal Balti raudtee Uued ühendusteed: Tapa-Tartu-Valga-Riia ning Valga-Võru-Pihkva Haapsalu Pärnu, Valga Mõisaküla Viljandi ja Tallinnaga Türi, Paide Tamsaluga Peterburi ja Venemaa sisekubermangud Läti Tööstusettevõtted Asulate rajamine Avardusid kauba-vahetuse võimalused Transiitveosed Tallinn sisseveosadam Pärnu väljaveosadam Arenes sisekaubandus 1862. aastal 62 000 inimest Sajandi lõpul 181 000 inimest 12 linna Kasvasid alevid ja alevikud Sajandi teisel poolel eestlaste ülekaal Tsunfisundus 1877. aastal Vene linnaseadus Linnavolikogu Linnavalitsus Linnapea Varanduslik tsensus Püüeldi paremale majanduslikule järjele · Haritlased, ametnikud · Teisejärgulised kodanikud · Saksa keel, kombed ja meelsus · Häbeneti oma päritolu · Kadakasakslased Eesti ajalugu I. Muinasajast 19. sajandi lõpuni Wikipedia.org Google.ee Aitäh
ning säravad, piirjooned väga sulavad · Natüürmordid, lapsed, naiste portreed ja maastikud. "Niidul" "Kiik" · Esimene tunnustus 1874. impressionistide maalide näitusel. · Sealt algas Renoir edu ja tuntus · Sai kuulsaks üle maailma. · Lõuna-Prantsusmaal elades muutus ta värviskaala rikkamaks. · Renoir oli väga viljakas kunstnik. · Tegi elu jooksul mitmeid tuhandeid maale. · Suurim kollektsioon tema töödest, mis sisaldab 181 maali, asub Philadelphia kunstimuuseumis. "Portree endast" "Beaulieu maastik" "Roosid ja jasmiinid vaasis" "Jalutuskäik" "Rannal" "Seine' kallastel" "Tüdrukud klaveri ääres" "Aias" "Kaks õde terrassil"
SPORT L A NE K A I A KANEPI SANDER KULMA ISIKUANDMED · TEGELEB TENNISEGA · RIIK EESTI · SÜNNIKOHT HAAPSALU · 32 AASTAT VANA · 181 CM PIKK · KAALUB 74KG SPORTLASKARJÄÄR · PROFIKARJÄÄRI ALGUS 2000.A · AUHINNARAHA 4,9M USA DOLLARIT MÄNGUSTIIL · KANEPI ON WTA ÜKS TUGEVAMAID SERVIJAID: PÄRIS TIHTI ULATUB TEMA SERVIKIIRUS 170180 KILOMEETRINI TUNNIS (SENINE MAKSIMUM 196 KM/H). SAMUTI ON VÄGA TUGEV TEMA TEINE SERV. KANEPI LÖÖB TAGAJOONELT VÄGA TUGEVALT JA TEMA EESKÄELÖÖK ON ERITI OHTLIK. TAVALISELT MÄNGIB TA VASTASED ÜLE KIIRE RÜTMI JA TÄPSETE ÄRALÖÖKIDEGA. ÜKSIKMÄNGUD
VÄLISEESTI KIRJANDUS · Kokku lahkus 40datel üle 100 000 inimese · 22 000 läks Rootsi, 40 000 Saksamaale, 17 000 Kanadasse · Visnapu läks USA'sse, Viirlaid Kanadasse, Suits Rootsi, nagu ka Gailit, Adson, Under · Rootsis eesti kirjandusajakirjad · Pagulaslaagrid · Kohanemine asukohamaa kultuuriga kergendatud soosiv suhtumine · Asutati omakeelseid koole · Pagulaskirjandus jõulisem kui kodukirjandus · Paguluses ilmus 181 luulekogu, 267 romaani, 155 memuaari · 1944 kirjastus Orto Kanadas · 1945 asutati Välismaine Eesti Kirjanike Liit · Esialgu tiraazid liiga suured võrreldes kogukonnaga · Ajakirjad: Eesti Looming, Sõna, Tuli Muld, Mana · Rühmitus Tuulisui · Põlvkonnad: I Suits, Under, Adson, Visnapu, Gailit II Lepik, Laaban, Kangro, Kolk, Viirlaid III Nõu, Toona, Ivask, Laaman IV Ilves, Kostabi · Meenutati elu enne pagulust · Kodumaaigatsus
x 1 1 2 1 6 6 1 2 1 1 3 5 2,5 x 1 1 2 1 6 6 1 2 1 1 2 3 2,25 x 1 1 2 1 6 6 1 2 1 1 2 6 2,5 Kokku 10 10 20 10 60 60 10 20 10 10 28 50 1 77 31 62 187 48 10 167 7 189 25 26 144 81,08333 2 17 71 122 96 69 101 11 54 185 70 174 -5 80,41667 3 164 49 110 181 56 159 141 143 0 12 140 58 101,0833 4 33 116 76 31 152 113 186 179 -6 117 85 73 96,25 5 28 106 138 22 187 121 28 160 181 148 150 46 109,5833 Kokku 319 373 508 517 512 504 533 543 549 372 575 316 Sigrid-Kristiina Simson111216 YAGB12 24.09.2011 S i g r i d x x x x a b Kesk S 1 1 2 1 6 6 1 2 1 1 3 5 2,5
Ehkki mõõdetav absorptsioon on tingitud kõikidest lahuses olevatest, aromaatset tuuma sisaldavatest aminohapetest, väljendatakse kaseiini hüdrolüüsi produktide sisaldus türosiini kontsentratsioonina mg/ml või mol/ml (1 mol = 181 g = 0,181 mg). Töö käik: Ensüümiprepadaadist töölahuse valmistamine Uuritavast proteaasi preparaadist valmistan lahus, milles ensüümi kontsentratsioon võrdub 1,5 mg/ml. Ensüümina kasutan savinaasi. Analüütilistel kaaludel kaalun 7,5 mg ensüümi. Minu kaalutis on 0,0081 g. Viin kadudeta ensüümi gradueeritud katseklaasi ja lisan väike kogus puhverlahust. Segan klaaspulgaga u 5 min kuni ensüüm on lahustunud. Seejärel lisan puhverlahust 5 ml-ni ja loksutan läbi.
D280;1=0,150 D280;2=0,154 D280;3=0,219 D280;4=0,269 CTyr;1=0,024 M CTyr;2=0,025 M CTyr;3=0,034 M CTyr;4=0,043 M Esimeses katseklaasis saadud tulemus ei saanud õige olla. Nimelt oleks pidanud kõigi nelja proovi optiliste tiheduste vahe olema (enam-vähem) võrdne. Esimese katseklaasi viga võis seisneda selles, et pärast reaktsioonisegu valmimist ei segatud seda piisavalt. Graafiku tegemisel kasutan kolme järgmist tulemust: Arvutused Valem: CTyr 103 V1 V2 2 A= t 181 V3 g CTyr türosiini kontsentratsiooni muutus valitud ajavahemikus (mg/ml) t hüdrolüüsi kestus (s) V1 reaktsioonisegu üldmaht (26 ml) V2 valmistatud ensüümilahuse üldmaht (10 ml) 2 TKÄ lahusest tingitud proovi lahjendus (3 ml 6 ml, seega L=2) V3 ensüümi math hüdrolüüsisegus (1 ml) g proteaasi (alkalaas) preparaadi kaalutis (12 mg = 0,012 g) 181 türosiini molekulmass (0, 043 - 0, 025)mg / ml 103 26ml 10ml 2 0, 018mg / ml 103 26ml 10ml 2
Eesti M 187 94 59 46 1 3 Eesti M 183 83 56 43 3 3 Eesti M 190 102 59 46 1 3 Eesti M 173 58 55,5 42,5 1 3 Eesti N 157 63 55,5 38 1 4 Eesti M 180 80 56 43 2 3 Eesti M 180 84 60 43 1 3 Eesti M 175 87 54 45 3 3 Eesti M 181 81 55 43 2 3 Eesti M 177 75 54 42 1 3 Eesti N 175 60 53 39 1 4 Eesti M 185 100 67 45 2 3 Eesti N 176 75 56 41 0 3 Eesti N 170 100 56 42 1 4 Eesti M 179 59 56 44 1 3 Eesti M 193 75 55 44 3 3
E-VITAMIIN Kristjan Jostov KBp-12 Mis asi on E-vitamiin? E-vitamiin on rasvlahustuv vitamiin, mille vormid on lähedase ehituse, antisteriilsuse ja antioksüdantse toimega rasvlahustuvad ühendid. Laialdaselt kautuses ka kosmeetikas, kuna võitleb vabade radikaalide vastu ja seega enneaegse vananemise vastane. Kust saame Evitamiini ? E-vitamiini allikateks on rafineerimata taimeõlid (nisuiduõli) ning kõik terved toored seemned, pähklid, sojaoad, oliivid, täisterajahu, lehtsalat, porgand, tomat. Loomsed toiduained on E-vitamiini sisalduselt suhteliselt vaesed, vähesel määral leidub seda maksas, munarebus ja seapekis. Enamus puu- ja juurvilju ei ole just kõige paremad E-vitamiini allikad. Miks on E-vitamiini on vaja: rakkude vananemise pidurdamiseks, kapillaaride seinte tugevamaks muutmiseks, lümfotsüütide, puna- ja valgeliblede kaitseks, mille tõttu paraneb organismi varus...
6 1516 VP3 1494 1077 + 24 41.856 V 6 1545 - 17 - 16 41,441 1596 - 14 - 15 41,426 7 1562 VP4 1610 1777 - 181 41.260 VI 7 1600 - 145 - 142 41,426 1539 - 140 41,284 8 1745 1679 RP 2 8 1128 - 267 - 266 41,018 1100 - 266
The Inuksuk Marit & Mari- Liis 9b symbol in the Arctic built from the stones "likeness of a person"( inimese sarnane) Used in many different ways. the way home warn of dangerous places showed where food was stored help hunt caribou herds (karjad) work of humans many Inuit lived on the sea ice stars in the night sky were important. Some Inuksuit were built to point toward the North Star Today much more than just a stone marker( kivid) symbol of the North and of leadership Traditional to mark their presence both in the Arctic and across this country. http://www.flickr.com/photos/aqaf33/6092241093/ http://www.pic2fly.com/Inutchuk.html http://www.google.ee/imgres? q=inutshuk&hl=et&biw=1680&bih=949&tbm=isch&tbnid= 5WUEz5RgVmQirM:&imgrefurl=http://aygues-vives- luzenac.com/En_Lesgites.htm&docid=gSyCFOShLKPK OM&imgurl=http://aygu...
B klass VKK Suurbritannia asend · Euroopa mandriosa looderanniku lähedal · - Suurbritannia saarel · - Iirimaa saarel · - Hulgal väiksematel saartel · Ümbritsevad · - Põhjameri · - La Manche'i väin · - Atlandi ookean Koordinaadid · Laiuskraadid: 54° N ja 60° N · Pikkuskraadid: 2° W ja 2° E · 850 km põhjast lõunasse · 625 km idast läände Riigi suurus · Pindala 243 610 km² · Rahvastik 63 181 775 (2011) Pinnavorm · Suurbritannia saare põhja- ja lääneosa o Mägine o Seal paiknevad vanad mäed, mille vahel on sügavad orud Naaberriigid ja piir · Iirimaa ja Prantsusmaa · Piir kulgeb mererannikul Rahvastik · Pindala: 242 900 km² · Rahvaarv: 61 113 205 · Rahva keskmine tihedus: 254,7 in/km² · Rahvastik paikneb ebaühtlaselt Piirkonnad · Tihedamad: Põhja- Inglismaa ja lõuna piirkond
piinu. Tantaal ei reageerinud hapete ega isegi kuningveega ning ületas püsivuselt isegi väärismetalle. Tantaal on suure tihedusega(16,6g/cm³) rasksulav(3014 Celsiuse kraadi) hõbehall metall. Tantaal on erakordselt püsiv ja vastupidav keemilistele mõjutustele. See lahustu üheski happes ega kuningvees. Reageerib ainult vesinikfluoriidhappe ja lämmastikhappe seguga. Tantaal esineb looduses 2 isotoobina. Isotoop massiarvuga 181 on stabiilne. Isotoop massiarvuga 180 on radioaktiivne. Et tantaal ei ärrita eluskudesid, siis kasutatakse seda plastilises kirurgias ja luude operatsioonides; tantaalniidiga õmmeldakse närvikiude või tantaalklambritega ühendatakse veresooni. Umbes pool tantaali maailmatoodangust leiab rakendamist sulamite valmistamisel. Tantaalilisand muudab metallisulamid ülitugevaks korrosiooni- ja kuumakindlaks. Tantaalisulamite saranuses tõttu plaatiniga valmistatakse neist ehteid.
Harjutus 15 1 1 Leia arvuderea 2 Minimaalne väärtus 1 2 Maksimaalne väärtus 200 2 Mood 146 3 Mediaan 103 4 Aritmeetiline keskmine 103.0569476 4 Teine kvartiil 103 5 Kolmas kvartiil 158 5 6 6 ...
PTOLEMAIOSTE EGIPTUS 334-325 e.Kr. Aleksander Suure sõjaretk Süüriasse, Mesopotaamiasse, Egiptusse, Pärsiasse ja Indiasse, millega loodi hiiglaslik hellenistlik impeerium. 323 e.Kr. Aleksander Suur suri. Tema väejuhid (hiljem nimetatud diadohhideks ehk järglasteks) jagasid impeeriumi omavahel ja hakkasid sõdima, mis lõppes neist enamuse hävinguga. Säilisid 4 riiki: Kreekas jäi valitsema Antigonos (382-301 e.Kr.) ja tolle järglased. Anatoolias (keskusega Pergamonis) jäi valitsema Philetaeros (343-263 e.Kr.), kes oli Aleksandri ühe tuntuima väejuhi ja hilisema diadohhi Lysimachose väes ohvitser. Lysimachos ise oli lõpuks purustatud, ent Philetaeros suutis päästa osa ta valdustest. Süürias ja Mesopotaamias jäi valitsema Seleukos (358-281 e.Kr.). Egiptuses jäi valitsema Ptolemaios (367-283 e.Kr.). Süüria ja Egiptuse hellenistlikud riigid vallutati Rooma poolt alles 64 e.Kr. ja 30 e.Kr. Egitpuse ...
arvesse,sest see ei ole täpne ja tõenäoline.Selline tulemus tuli välja,sest katseklaasi oli valatud liiga suur või liiga väike kogus reaktsioonisegu,või pärast kolmanda proovi võttmist on möödunud vähe aega.) Türosiini kontsentratsioon graafiku alusel (mg/ml): 1) 0,028 mg/ml 2) 0,032 mg/ml 3) 0,035 mg/ml 4) 0,037 mg/ml( ei võtta arvesse) Graafik: Ensüümipreparaadi proteolüütilise aktiivsuse arvutamine A = CTyr · 103 · V1 · V2 · 2 / t · 181 · V3 · g CTyr türosiini kontsentratsiooni muutus valitud ajavahemikus (mg/ml), t hüdrolüüsi kestus st valitud ajavahemik (s), V1 reaktsioonisegu (substraat + ensüüm) üldmaht (ml), V2 valmistatud ensüümilahuse üldmaht (ml), 2 TKÄ lahusest tingitud proovi lahjendus (3 ml 6 ml, seega L = 2), V3 ensüümi maht hüdrolüüsisegus (ml), g proteaasi preparaadi kaalutis (g), 181 türosiini molekulmass. =900(sek)
ei pruugi olla üldse selline nagu nemad ise seda endale ette kujutavad. Sagedasti on õpetajad need, keda kiustatakse. Neid narritatakse, halvustatakse, mõnitatakse jne. Enamasti on vägivald õpetajate vastu vaimne, väga harva füüsiline. Kuigi on rakendatud väga palju erinevaid meetmeid koolivägivalla lõpetamiseks, pole see eriti palju aidanud. Vägivald on koolidse jätkuvalt tõusuteel. Üha enam kurdavad õpetajad ja õpilased, et on sattunud kiusamise ohvriks. 181. Kui soovime vähendada ja koolivägivalla sooduks ära kaotada, peame me kõik midagi selle jaoks tegema. Me kõik peame lõpetama üksteise kiusamise, narrimise ja muu vägivallatsemise. Ainult niimoodi on võimalik kaotada vägivald koolis ja ka mujal. Ütleme kõik üheskoos: ,,Ei vägivallale!"
tulnud pärast Eesti Vabariigi okupeerimist Põhiliselt 1959-1970 Miks on kadunud soome-ugri keel? · Venestamine oli kiire,tulijate lapsed enam oma rahvuskeelt ei oska. Eestis elavate soome-ugri rahvaste arv rahvaloenduse andmetel RAHVUS 1959 1970 1979 1983 Soomlased 16 699 18 537 17 753 16 622 Karjalased 295 671 773 881 Isurid 366 181 228 306 Ungarlased 30 111 191 241 jne. Kasutatud materjal Wikipedia.org
annaabi.ee 
Sisene Facebook'ga
Sisene Google'ga
Sisene LinkedIn'ga
