"pipetaaritakse" - 1 õppematerjal

Invertaasi aktiivsuse määramine

taandavate suhkrute kontsentratsioon reaktsioonisegus. Invertaasi aktiivsus avaldataks e mikrokatalites ensüümlahuse 1 ml kohta. Töö käik Ensüümpreparaadist töölahuse valmistamine  Automaatpipeti abil viiakse gradueeritud katseklaasi 0,25 ml vedelat ensüümpreparaati.  Katseklaas täidetakse 10 ml-ni puhverlahusega.  Katseklaas suletakse korgiga ja loksutatakse kontsentratsiooni ühtlustamiseks. Ensüümreaktsiooni läbiviimine  50 ml katseklaasi pipetaaritakse 25 ml substraati: 7% sahharoosi lahus atsetaatpuhvris pH-ga 4,8.   Katseklaas suletakse korgiga ning asetatakse 5-10 minutiks vesitermostaati soojenema.  Kolme 250 ml koonilisse kolmgi pipeteeritakse 10 ml komplekslahust.  Kui substraat on termostaadis vastava aja soojenenud, võetakse see välja ning lisatakse 1 ml uuritavat invertaasi töölahust ja loksutatakse.  Kohe pärast reaktsioonisegu loksutamist võetakse sellest pipetiga 1 ml