RAKENDUSBIOLOOGIA KONSPEKT
(PCR ) meetodit kasutades.
Lõigatud fragmendid on erineva pikkusega, kuid lahuses segamini.
See proov pannakse geeli, geel pannakse elektrolüüsi vanni.
DNA-lõigud jooksevad + pooluse poole, seda kiiremini, mida lühemad nad on.
PCR metoodika:
Ependorfis segatakse kokku:
nukleotiidid (kõiki nelja erinevat)
DNA-polümeraas
oma DNA lahus
praimerid - lühikesed DNA lõigud, mis on
komplementaarsed analüüsitava DNA-
piirkonna mõlema "otsaga".
Ependorf pannakse 3 tunniks PCRmasinasse.
PCR-masinas toimub DNA uuritavate lõikude paljundamine tänu pidevale
temperatuuride vaheldumisele:
92o C DNA denatureerub
58° C praimerid liituvad
72o C DNApolümeraas
käivitab replikatsiooni.
See tsükkel kordub
masinas 34 korda.