"nukleotiidahelaid" - 1 õppematerjal

Meditsiinilise mikrobioloogia praktikum

ÜHEAHELALISE NUKLEIINSONDI VALMISTAMINE JA MÄRGISTAMINE E. SONDI DISAIN sõltub eesmärgist. Kui soovitakse leida uuritavas materjalis grampositiivseid baktereid, peab sond olema komplementaarne ainult grampositiivsetel bakteritel leiduva DNA järjestusega. Võimalik on 64 konstrueerida sondi perekonna, liigi, isegi teatud geeni eristamiseks (näiteks virulentsust või RR determineerivat). Hübriidi moodustanud nukleotiidahelaid peab olema võimalik avastada ja eristada nukleiinhappe mittehübridiseerunud lõikudest. Selleks kasutatakse diagnostilist reporter-molekuli ehk märgistatud DNA või RNA (moodustabki sondi!), mis on kas: • radioaktiivsed (32P, 125I, 35S) või • mitteradioaktiivsed (biotiin-avidiin, digoxigeniin,fluorokroomid). Radioaktiivselt märgistatud sondide kasutamine kliinilises diagnostikas on komplitseeritud. Rohkem on