Valgu kontsentratsiooni määramine Bradfordi meetodil
Originaaltöös kasutati valgustandardiks BSA-d (bovine serum albumine), mis on jäänud
laialdaselt kasutusse. Siiski on täheldatud, et BSA annab tugevama värvimuutuse, kui enamik
valke, mistõttu võivad BSA abil määratud valgu kontsentratsioonid olla kõrgemad tegelikust.
Tihti kasutatakse valgu standardiks ka immunoglobulin G-d (IgG).
Mõõtepiirkond:
Bradfordi meetodil on võimalik määrata valgu kontsentratsiooni vahemikus 100-1,500
µg/ml Bradfordi mikromeetodil on võimalik määrata valgu kontsentratsiooni 1-25 µg/ml.
Segavad reagendid.
Bradfordi meetodit ei sega enamus reagente (e.g. sahharoos, urea, glütserool, taandavad
reagendid ja tioolid), kuid segavad detergendid (e.g. > 0.1% SDS and > 1% Triton series) või
rakulised lipiidid, mis suurendavad CBBG lahuse absorbtsiooni 590 nm juures.
CBBG seostub tugevasti kvartsküvettide seintele, mistõttu on soovitav kasutada klaas või
plastikküvette.
Reaktiivid
Terve grupi peale: