retensiooniaegades. Kui RS = 0 elueeruvad ained koos, ainete täielikuks lahutumiseks peab RS olema vähemalt 1,5-2. Tavaliselt on piigi laiust poolkõrgusel palju kergem mõõta kui piigi aluse laiust. Sellisel juhul näeb lahutuvuse valem välja järgmine, kus w0.5,1 and w0.5,2 on piigi laiused poolkõrgusel: (t m2−t m 1) RS =1,18 (W 1 + W 1 ) ;1 ;2 2 2 Mahtuvusfaktor ehk retentsioonifaktor (k’) - analüüdi viibimise aja statsionaarses faasis suhe analüüsi viibimise ajaga mobiilses faasis, tavaliselt k’=1–20. Piik mahtuvusfaktoriga 0 läbib kolonni statsionaarse faasiga interakteerumata ning väljub mobiilse faasi frondil: ' ( t R−t0 ) t 'R K= = t0 t0 Selektiivsuskoefitsent (�) - määratud faasisüsteemi (liikumatu faas/eluent) ja analüüdi omadustega, ainete lahutumiseks peab � > 1: '
39.Kromatograafia definitsioon Kromatograafia - ainete segu komponentideks lahutamine. Teostatakse kolonnis, mis on täidetud statsionaarse faasiga ja läbi mille voolab mobiilne faas. 41. Kuidas tekib kromatogramm? 42. Kromatograafilise piigi kuju 43. Aine tsooni laiust määratavad faktorid 45. Palun defineerige: retentsiooniaeg, retentsiooniruumala, surnud aeg 46. Mida näitab asümmeetriafaktor? 47. Protsessi lahutuvus (definitsioon, valem) 48. Mahtuvusfaktor (definitsioon, valem) Mahtuvusfaktor näitab kui tugevasti analüüt interakteerub statsionaarse faasiga. 49. Selektiivsus (definitsioon, valem) Selektiivsus – see on kromatograafilise süsteemi omadus „keemiliselt“ eristada kahte erinevat ainet 50. Efektiivsus (definitsioon, valem) Efektiivsus arvestab retentsiooniaega ja piigi laiust. On selge, et efektiivne kolonn on võimeline produtseerima kitsamaid piike lühema ajaga.
8. Palun defineerige: retentsiooniaeg, retentsiooniruumala, surnud aeg Retsensiooniaeg tR - aeg alates proovi süstimisest kuni aine piigi maksimumi ilmumiseni Retsensiooniruumala VR - mobiilse faasi ruumala, mis on vajalik kuni aine piigi maksimumi ilmumiseni. Surnud aeg tm - aine retsensiooniaeg, kui puudub interaktsioon statsionaarse faasiga, liigub sama kiiresti kui mobiilne faas. 10. Protsessi lahutuvus (definitsioon, valem) Lahutuvus - kolonni võimsus lahutada kaks piiki. 11. Mahtuvusfaktor (definitsioon, valem) Mahtuvusfaktor ehk retsensiooni faktor on piigi asukoha mõõduks kromatogrammil ning on konstantne antud tingimustes antud ühendile. 12. Selektiivsus (definitsioon, valem) Selektiivsus - see on kromatograafilise süsteemi omadus `keemiliselt' eristada kahte erinevat ainet. 13. Efektiivsus (definitsioon, valem) Efektiivsus arvestab retsentsiooniaega ja piigi laiust. Teoreetiliste taldrikute arv (N) on kolonni efektiivsuse numbriline näitaja. 14
valgud läbi keskkonna (statsionaarse faasi) või läbi kapillaari. Selle protsessi käigus liiguvad ioonid erinevate kiirustega ja on eraldatavad. Kasutamine: DNA, RNA, ioonsed ühendid Põhimõisted kromatograafia: VR-retentsiooniruumala - liikuva faasi ruumala, mis on vajalik poole aine elueerimiseks kolonnist tR-aine retentsiooniaeg - aeg, mis kulub poole aine elueerimiseks kolonnist konstantse voolukiiruse juures k`- mahtuvusfaktor (näitab aine kontsentratsiooni erinevust mobiilses ja statsionaarses faasis) -selektiivsus N-efektiivsus e. teoreetiliste taldrikute arv Rs-lahutuvus Rs näitab kui hästi on 2 lähedast piiki omavahel lahutunud Van Deemteri võrrand: H=A+B/u+(Cm+Cs)u A:aine molekulide teepikkuste erinevus;B:ainetsooni difusiooniline laienemine kolonnis;Cm:massivahetus liikuvas faasis ;Cs:massivahetus liikumatu ja liikuva faasi vahe
(statsionaarse faasi) või läbi kapillaari. Selle protsessi käigus liiguvad ioonid erinevate kiirustega ja on eraldatavad. Kasutamine: DNA, RNA, ioonsed ühendid Põhimõisted kromatograafias- VR-retentsiooniruumala - liikuva faasi ruumala, mis on vajalik poole aine elueerimiseks kolonnist tR-aine retentsiooniaeg - aeg, mis kulub poole aine elueerimiseks kolonnist konstantse voolukiiruse juures k`- mahtuvusfaktor (näitab aine kontsentratsiooni erinevust mobiilses ja statsionaarses faasis) -selektiivsus N-efektiivsus e. teoreetiliste taldrikute arv Rs-lahutuvus Rs näitab kui hästi on 2 lähedast piiki omavahel lahutunud Van Deemteri võrrand- (üldkuju) H=A+B/u+(Cm+Cs)u A:aine molekulide teepikkuste erinevus(kapillaarkolonnide korral paraboolne vooluproofil) B:ainetsooni difusiooniline laienemine kolonnis Cm:massivahetus liikuvas faasis Cs:::massivahetus liikumatu ja liikuva faasi vahe
Kasutada võib piigi pindala või kõrgust. Enamiku detektorite puhul on piigi pindala võrdelises sõltuvuses kontsentratsiooniga, misjuhul on kalibreerimisgraafik sirge ja läbib nulli. 107. Mida nimetatakse komponendi retentsiooniajaks ja mida surnud ajaks? Retentsiooniaeg aeg, mis kulub aine sisestamisest tema piigi maksimumi saavutamiseni. Surnud aeg on sellise aine retentsiooniaeg, mis statsionaarse faasiga üldse ei seondu. 108. Mahtuvusfaktor. Selektiivsusfaktor. Mida nad iseloomustavad? Mahtuvusfaktor k'= , kus tR- analüüdi piik, tM solvendi piik. Mõistlik: 1 < k' < 20, väga hea: 2 < k' < 10 (liiga suur k' halb, sest piik muutub liiga lamedaks, ei ole eristatav). Kõigi nende parameetrite abil saab: hinnata lahutuse headust; hinnata süsteemi korrasolekut ja määrata, millal on vaja midagi hooldada või välja vahetada. Selektiivsusfaktor: = ,