Molekulaarbioloogia
Selleks kasutatakse
isepaljunevaid susteeme voi polumeraas-ahelreaktsioooni. Isepaljunevate susteemidena
(nimetatakse ka vektoriteks) kasutatakse tavaliselt baketerite plasmiide voi viiruseid-
bakteriofaage. Plasmiid rongakujuline kaheahelaline DNA molekul, mis sisaldab
autonoomset paljunemist voimaldavaid geneetilisi elemente (eelkoige replikatsiooni
alguspunkti), selektiivset markerit (ampitsilliinile resistentsust tagavat geeni) ja unikaalseid
restriktaaside loikamiskohti (esinevad plasmiidis ainult uks kord). Vajalik DNA-loik
uhendatakse vektoriga ja moodustunud rekombinant-DNA viiakse bakteri rakku, kus vektor
asub paljunema tootes luhikese ajaga miljoneid koopiaid meid huvitavast DNA-fragmendist.
Plasmiidide abil geeni paljundamise pohietapid on jargmised 1) plasmiidi isoleerimine
bakterirakust (tavaliselt kasutatakse E. coli plasmiide); 2) plasmiidi "loikamine" spetsiifilise