Praktiline töö nr. 2: SDS-PAGE elektroforees NB! Geeli valmistamisel kasutasime akrüülamiidi, mis on tervisele kahjulik, seetõttu töötasime kummikinnastega. Elektroforeesi aparaadi kokku panemine Geelikihtide valmistamine: 1. Valmistada lahutav geel (resolving gel) (10%), mis koosneb järgmistest komponentidest: Akrüülamiid 30%/ bisakrüülamiid 0,8% 3,3 ml 4x lahutava geeli puhver (1,5M Tris-Cl, pH 8,8) 2,5 ml 10% SDS 0,1 ml mQ 4,0 ml APS 70 µl
Toiduhügieeni eesmärgid ·Kaitsta toitu saastumisohu eest e. toidu kaitsmine mikrobioloogilise, füüsikalise ja keemilise saastumise eest e. kontaminatsiooni ärahoidmine. ·Takistada bakterite paljunemist selle tasemeni, mis võib põhjustada tarbija haigestumist või toidu kiiret riknemist: hävitada kõik toidus esinevad patogeenid täielikult või seadusandluses kehtestatud tasemeni, kuumtöötlemise või mõne muu töötlemisviisi abil. termolabiilsete toksiinide hävitamine. Kindlaks on tehtud üle 200 toidutekkelise haiguse. Olulisemad toidupatogeenidest tingitud haigused ·Salmonelloos ·Kampülobakterioos ·Kolibakterioos ·Listerioos ·Botulism ·Jersinioos ·Trihhinelloos ·Koolera Toiduga seonduvad ohud Toiduoht on seotud järgnevaga: ·Inimene teadmised ja oskused, suhtumine, koolitus jne. ·Meetod valesti valitud töötlemisviis või tegevus. ·Seadmed füüsilised ja moraalselt vananenud seadmed, nende ebapiisav pesemine ja desinfitseerimine. ·Toor...
.....................................11 KASUTATUD KIRJANDUS..........................12 2 Sille Jürimaa Keemilised ohutegurid toiduainetööstuses SISSEJUHATUS Lisaks puu- ja juurvilja essentsainete ja toidulisandite kasutamisele peab toiduainetetööstuse töötaja kasutama ka põranda ja lauapindade puhastusvahendeid, sest oma töökoht tuleb korras hoida. Pidev kokkupuude niiskuse ja kummikinnastega suurendavad naha tundlikkust keemilistele ainetele. Riski suurendab suitsetamine. Kemikaal üksi toimet avaldavana ei ole nii ohtlik, kui mitmete kemikaali koosmõju. Kemikaalid satuvad meie organismi naha, hingamiselundite või seedetrakti kaudu. Toiduainetetööstuses üldkasutavad nõude, pindade ja töövahendite puhastusvahendid, mis sisaldavad erinevaid keemilisi ühendeid. Kemikaalid on enamuse pahaloomuliste kasvajate, astma ja neuroloogilis- psühhiaatriliste haiguste põhjustajad
suurim elektrivoolu tihedus südame piirkonnas. Kuna veri on hea elektrijuht, kannatavad elektrivoolu läbi eelkõige süda ja veresoonkond, mitte aga kesknärvisüsteem, mistõttu ei saavutata alati vajalikku uimastusefekti. /1,3,4/ Pärast uimastatud looma kukkumist tõstetakse boksi eessein üles, boksi põrand kaldub ja loom libiseb boksi ees olevale vastuvõtulauale või boksi esisel põrandal olevale matile. Boks peab olema maandatud ning uimastaja seisma kummist alusel ja töötama kummikinnastega, et vältida elektrivoolu alla sattumist. /1/ 5 Levinud meetod sigade uimastamiseks väikeettevõtetes on uimastamine suhteliselt madalapingelise elektrivooluga. Kasutatav pinge kõigub 80-115 V. Lähtudes looma heaolust pole see meetod soovitav. Uuringute tulemused näitavad, et teadvusetus ilmneb küllalt kiiresti juhul, kui voolutugevus ulatub vähemalt 1,0 A. Sellist voolutugevust 80-
propanool TE (10 mM Tris-HCl, pH 7,5; 1 mM EDTA-Na2) Ribonukleaas A TE-s (5 g/ml,; Sigma) Fenool, tasakaalustatud TE-ga (NB! Fenooli pipeteerida ainult kummikinnastes ja tõmbe all!). 70% ja 95% Etanool. 1 M Na-atsetaat (NaOAc), pH 5,5 (lisatakse DNA sadestamiseks) Agaroos (FMC) 1 x TBE foreesi puhver (TBE, 50 mM Tris-boraat, pH 8,3; EDTA-Na2) 1 x TBE foreesi pealekandmis-puhver (5 x TBE, 20% glütserool, 0,01% Broomfenoolsinine) EtBr 5 g/l (pipeteerida kummikinnastega, kantserogeenne) NB! Enne tööle asumist lugeda läbi fenooli ja etiidiumbromiidiga töötamise ohutuseeskiri (http://geen.ttu.ee/?id=10705, vt punkt C6. Fenooli ja etiidiumbromiidiga (EtBr) töötamine). Töö käik: 7 (1) Vala ~1,4 ml bakteri ON kultuuri tuubi, sule tuub ja tsentrifuugi maksimaalsel kiirusel 1 min. Tuubid
propanool TE (10 mM Tris-HCl, pH 7,5; 1 mM EDTA-Na2) Ribonukleaas A TE-s (5 g/ml,; Sigma) Fenool, tasakaalustatud TE-ga (NB! Fenooli pipeteerida ainult kummikinnastes ja tõmbe all!). 70% ja 95% Etanool. 1 M Na-atsetaat (NaOAc), pH 5,5 (lisatakse DNA sadestamiseks) Agaroos (FMC) 1 x TBE foreesi puhver (TBE, 50 mM Tris-boraat, pH 8,3; EDTA-Na2) 1 x TBE foreesi pealekandmis-puhver (5 x TBE, 20% glütserool, 0,01% Broomfenoolsinine) EtBr 5 g/l (pipeteerida kummikinnastega, kantserogeenne) NB! Enne tööle asumist lugeda läbi fenooli ja etiidiumbromiidiga töötamise ohutuseeskiri (http://geen.ttu.ee/?id=10705, vt punkt C6. Fenooli ja etiidiumbromiidiga (EtBr) töötamine). Töö käik: 6 (1) Vala ~1,4 ml bakteri ON kultuuri tuubi, sule tuub ja tsentrifuugi maksimaalsel kiirusel 1 min. Tuubid asetada tsentrifuugi nii, et tuubi ja kaant ühendav osa jääks väljapoole.
Retroviviridae -> Perekond – Deltaretrovirus -> Liik - veiste enzootilise leukoosiviirus -> Veiste enzootiline leukoos (leukeemia) Leukeemia on kasvaja, millele on omane vere valgeliblede või nende eelastete rohkus, mis tõrjub kõrvale muude vererakkude tekke, protsessiga kaasneb aneemia, trombotsütopeenia. Veiste enzootiline leukoos on ulatuslikult levinud kogu maailmas. Levik: Viiruse transmissioon toimub karjas horisontaalselt, nakkust võib levitada instrumentidega, kummikinnastega (rektaalsel uurimisel). Kindlaks on tehtud nakkuse vertikaalne levik. Infitseeritud lehmadel 10%-l juhtudel sünnivad nakatunud järglased. Nakkuse elimineerimiseks kontrollitakse loomi seroloogiliselt 2—3 kuuste intervallidega ja seropositiivsed loomad viiakse karjast välja. Üle 60% nakatunud loomadest ei haigestu, kuid neil tekivad antikehad viirusele. 30-70% loomadest tekib persisteeriv lümfotsütoos, umbes 10% arenevad kasvajad