Biokeemia praktikum. Töö 2.1 Geelkromatograafia
..1
Töö käik
1. Proovi andmed: =0.5 ml. Koostis: Dekstraansinine (6 mg/ml),
Müoglobiin (6 mg/ml), DNP-aspartaat (0.3mg/ml), proovi
lahusti ja eluent NaCl lahus.
2. Märgin ära kolonni andmed: geel on Sephadex G-75,
koeffitsient k=0.1, geelisambla kõrgus L=27.4 cm, diameeter
d=1.9 cm.
3. Arvutan vajalikud mahud:
;
;
4.Arvutan fraktsioonide üldarv: n= (tegelikult 29-s fraktsioonis oli
nii vähe elueerivat ainet, et sellega ma lõpetasin fraktsioonide
kogumist).
5. Asetan katseklaase statiivi ja nummerdan neid.
6. Geeli kohal olevat lahust kogun eraldi keeduklaasi (19.5 ml)
7. Kogun fraktsioone (29). Iga fraktsioon ~2 ml.
8. Mõõdan kogutud fraktsioonide absorptsioonid. 1-3 fraktsioonid
lainepikkusel 670 nm, 4-10 fraktsioonid lainepikkusel 410 (4
fraktsioon kahel lainepikkusel) nm ja 11, 12, 19-29 fraktsioonid